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  • 细胞周期调节因子基因在H9 c2心肌细胞肥大过程中的时相性表达变化

    作者:李敬美;丁圆媛;潘夕春;刘雅;陈晓红;张海港

    目的:观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导H9c2心肌细胞肥大过程中细胞周期调控因子mRNA的时相性表达。方法 AngⅡ(1.0μmol·L-1)刺激H9c2细胞,分别于0 min、5 min、10 min、30 min、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h,罗丹明标记鬼笔环肽染色并检测细胞面积;Re-al-time PCR法检测细胞周期蛋白(cyclin)B、D、E,细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDK)1、2、4、6,以及CDK抑制因子p21 mRNA的表达变化情况。结果随着Ang Ⅱ刺激时间的延长,H9 c2细胞面积逐渐增大;细胞周期调节因子均于刺激后出现短暂反应性表达增加,周期蛋白E与CDK2、CDK4 mRNA 在5 min 时达到峰值,周期蛋白 D mRNA在10 min时达到峰值,随后一直呈减少趋势;CDK6与周期蛋白B mRNA表达出现双峰现象,分别于5 min和30 min达第一峰,随后表达减少,于2 h达低点,接着又表达增加,于12 h达第二峰。p21 mRNA表达量于30 min达峰值,随后逐步减少,3h时表达低,之后又缓慢增加。结论Ang Ⅱ诱导H9 c2心肌细胞肥大发生的病理过程与细胞周期调控因子的震荡性表达相关,各因子共同促进细胞肥大反应。

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