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  • siRNA沉默MUC5AC基因对胆管癌HCCC-9810细胞生长的影响

    作者:任雪峰;黄强

    目的 探讨特异性MUC5AC-siRNA沉默MUC5AC基因后对人肝内胆管癌细胞株HCCC-9810生长能力的影响.方法 设计合成三对特异性siRNA,构建了三个稳定表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810,RT-PCR检测MUC5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测MUC5AC粘蛋白的表达;MTT检测细胞生长增殖情况.结果 基因测序表明成功构建质粒;转染后RT-PCR结果表明在mRNA水平,三个质粒都可抑制MUCSAC基因的表达,并可使MUCSAC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用.结论 构建pRNATU6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3质粒明显抑制了MUC5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达,并可抑制肿瘤细胞的生长增殖,为探讨MUC5AC在MUCSAC相关肿瘤的基因治疗方面奠定了一定的理论基础.

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