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阳性克隆分析文献资料
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一个具有诊断价值的弓形虫基因的发现
目的用弓形虫成囊株感染的小鼠血清筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库,以寻找诊断弓形虫病的抗原基因.方法收集成囊株(Prugniaud 株)慢性感染的小鼠血清,经滤膜吸附法去除大肠杆菌抗体,筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库.对3次复筛得到的阳性克隆进行插入片段的核苷酸序列测定,结果送GenBank进行同源性分析.根据序列测定结果,选取其中1个具有完整开放阅读框架的基因进行分析.结果获得4个持续阳性反应克隆.测序和同源性分析显示,WT1为弓形虫P30基因;WT4为弓形虫N-乙酰磷酸丙糖转移酶基因;WT9与已知的基因无同源性.WT12克隆基因与一未知的弓形虫基因有很高的同源性,且具有1个513 bp大小的完整开放阅读框架,其蛋白质结构和功能预测可能是1个跨膜信号蛋白.结论筛选得到的1个阳性克隆有望成为早期诊断抗原基因,值得进一步研究.
