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孕期吸入异氟醚对子代大鼠认知功能及海马GAP-43和NPY表达的影响
目的:探讨大鼠孕期吸入异氟醚对子代认知功能以及海马生长相关蛋白-43 (GAP-43)和神经肽Y(NPY)表达的影响.方法:选取孕龄为18 d的SD大鼠12只,随机分为异氟醚处理组和对照组(n=6).异氟醚组使用1.3％的异氟醚处理6h,对照组吸入含30％氧气的空氧混合气体.待幼鼠出生4周后,使用水迷宫实验,检测幼鼠空间学习记忆能力.测试结束后,取其海马组织行免疫组织化学染色,观察GAP-43和NPY在两组仔鼠海马CA1区表达的差异.结果:在水迷宫测试中,与对照组仔鼠相比,异氟醚组仔鼠平均逃逸潜伏期时间明显延长(P＜0.05)、第三象限活动时间和穿越平台次数明显减少(P＜0.05).异氟醚组仔鼠海马CA1区神经细胞内GAP-43和NPY的表达均较正常对照组明显下降,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:1.3％异氟醚处理孕18 d的大鼠6h可导致仔鼠学习记忆功能降低,这可能与海马CA1区GAP-43和NPY表达下调有关.
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异氟烷预处理对大鼠肝部分缺血再灌注时脑的保护作用
目的 通过观察在体大鼠肝部分缺血再灌注损伤下外周血中S-100β蛋白含量的变化,结合脑组织线粒体形态学的改变明确异氟烷预处理对大鼠肝部分缺血再灌注时对脑损伤是否具有保护作用.方法 SD大鼠简单随机法分成假手术组(S组),肝缺血再灌注组(I/R组),异氟烷预处理组(ISO组).S组:入腹后只分离肝十二指肠韧带,但不阻断肝门血供；I/R组:肝缺血60 min,再灌注120 min; ISO组:肝I/R前60 min ISO预处理30 min,后在空气中洗脱30 min,再灌注24 h迅速断头取前脑,透射电镜下观察脑线粒体超微结构；各组分别于缺血前及再灌注120 min后抽取静脉血采用双抗体夹心-ELAISA法测定S-100β蛋白含量.结果 I/R组超微结构脑线粒体肿胀,嵴断裂、溶解,内呈空泡状,线粒体形态及膜完整性发生了重大变化,外周血液S-100β蛋白I/R组[(1.52±0.26) μg/ml]显著高于对照组[(0.31 ±0.05)μg/ml](P＜0.05);ISO组线粒体仅有轻度肿胀,嵴及内膜间隙仍可见,S-100β蛋白ISO组[(0.79 ±0.21) μg/ml]明显低于I/R组(P＜0.05).结论 大鼠肝部分缺血再灌注后对脑组织造成了一定程度损伤,而异氟烷预处理对此具有一定保护作用.
关键词： 大鼠 Sprague-Dawley 疾病模型 动物 缺血预处理 异氟醚/药理学 肝 再灌注损伤/预防和控制 脑/药物作用 -
异氟醚预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响
目的 观察异氟醚预处理对大鼠肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的影响,并探讨肿瘤坏死因子-α( TNF-α)在其中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠36只,随机分成假手术组(S组),缺血再灌注组(L/R组)和异氟醚预处理组(Iso+ I/R组),每组各12只.S组进腹后仅分离韧带不阻断血流；I/R组行肾脏缺血45 min,再灌注2h；Iso+I/R组吸入1.5％ (1MAC)异氟醚30 min,停止吸人10 min后行I/R.在再灌注2h后测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的含量,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定肾组织中TNF-α的浓度,同时取肾组织进行HE染色观察病理学改变.结果 (1)与S组比较,I/R组和Iso+I/R组血清BUN和Cr表达水平、肾组织中TNF-α浓度均升高[BUN:( 17.69±0.99) mmol/L vs(8.37±1.12)mmol/L,t=-23.55,P＜0.01;(12.26±1.11)mmol/L vs (8.37±1.12)mmol/L,t=- 19.09,P ＜0.01;Cr:(103.22±13.42)μmol/L vs(71.48±8.59) μmol/L,t=-21.45,P＜0.01;(86.51±11.49)μmol/Lvs(71.48±8.59) μmol/L,t=-9.87,P＜0.01;TNF-α:(0.51±0.07)ng/ml vs(0.43±0.00)ng/ml,t=-5.79,P＜0.01;(0.47±0.03)ng/mlvs(0.43±0.00)ng/ml,t=-8.86,P ＜0.01].(2)Iso +I/R组血清BUN和Cr表达水平、肾组织中TNF-α浓度的升高幅度均小于I/R组[BUN:( 12.26±1.11)mmol/L vs( 17.69±0.99)mmol/L,t=15.67,P＜0.01;Cr:(86.51±11.49) μmol/L vs(103.22±13.42) μmol/L,t=6.68,P＜0.01;TNF-α:(0.47±0.03)ng/ml vs (0.51±0.07)ng/ml,t =2.61,P ＜0.05].(3)I/R组、Iso+ I/R组肾小管评分较S组升高[(17.26±1.45)vs(0.00±0.00),t=-72.38,P＜0.01；(12.69±1.83)vs(0.00±0.00),t=- 39.53,P＜0.01].Iso+I/R组肾小管评分较I/R组下降[(12.69±1.83) vs (17.26±1.45),t=19.87,P＜0.01].结论 1.5％异氟醚预处理30min可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其部分机制可能与下调肾组织中TNF-α水平有关.
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一氧化氮在异氟烷预处理脑保护中基因表达的作用
目的 通过观察异氟烷预处理在鼠脑缺血再灌注损伤中凋亡相关基因Bcl-2和Bax的mRNA的表达,探讨异氟烷预处理脑保护作用的一氧化氮信号传导通路.方法 75只雄性沙士鼠,随机分5组.假手术组(SHAM组):只分离双侧颈总动脉而未予夹闭;缺血再灌注组(I/R组):夹闭双侧颈总动脉5 min后开放造成I/R;异氟烷预处理组(ISO组):I/R前60 min吸入1.2%-1.5%异氟烷30 min;氨基呱(AG)+1SO组:腹腔内注射AG 200 mg/kg,30 min后同ISO组;AG组:I/R前30 min注射AG.再灌注24 h.取鼠前脑,采用RT-PCR检测脑组织中Bcl-2、Bax基因的mRNA表达.结果 ISO组Bcl-2的mRNA表达增高(1.22±0.12).与SHAM组(0.83±0.16)、I/R组(0.83±0.11)和AG十ISO组(0.82±0.12)比较差异有统计学意义(P<0.05);I/R和AG组Bax mRNA的相对表达量明显增高,与SHAM组比较差异有统计学意义(P<0.05),ISO组和AG+ISO组表达较弱,但AG+ISO组比ISO组表达略强.结论 一氧化氮信号传导通路是异氟烷预处理脑保护作用的途径之一.
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异氟醚对新生大鼠认知功能和突触素表达的影响
目的 观察异氟醚对新生大鼠认知功能的影响及其机制和海马突触素(synaptophysin)的影响.方法 新生1周Wistar大鼠40只,雌雄不拘,随机分为5组(n=8):对照组(A组)吸入空气;B、C组分别吸入1.8%和1.2%异氟醚6 h,D、E组分别吸入1.8%、1.2%异氟醚3次,1次/d,2 h/次.吸入异氟醚后3周进行认知功能测试,包括旷场实验和Morris水迷宫测试,然后取大鼠海马组织行免疫组织化学染色,测定突触素表达.结果 吸入异氟醚可导致大鼠认知功能降低,海马突触素表达增加(P＜0.05),吸入高浓度异氟醚后海马突触素表达增加更明显,单次吸入和多次吸入异氟醚海马突触素表达无影响(P＞0.05).结论 异氟醚可降低新生大鼠认知功能,并上调海马突触素表达.
