首页 > 文献资料
-
HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质
目的 HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质方法的建立.方法 色谱柱为Agilent Zorbax SAX(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.80g加水800 mL,用磷酸调节pH值至3.3,加水稀释至1000 mL),流速0.5 mL.min-1,检测波长258nm.结果 脱氧核苷酸钠中脱氧胞嘧啶核苷酸(d-CMP)、脱氧腺嘌呤核苷酸(d-AMP)、脱氧胸腺嘧啶核苷酸(d-TMP)、脱氧鸟嘌呤核苷酸(d-GMP)4种单核苷酸的进样量分别在0.0176~3.3827μg、0.0196~ 3.7580μg、0.0148~2.8477μg和0.0180~3.4528μg内与峰面积线性关系良好(r均为1.000); d-CMP、d-AMP、d-TMP、d-GMP的平均回收率分别为96.73%,97.51%,97.98%,98.39%;RSD分别为0.17%,0.39%,1.32%,0.32%(n=9);精密度、重复性良好.结论 采用本方法主峰与杂质峰的分离度好,结果准确可靠,灵敏度高,为本品质量标准的修订和提高提供了基础.
-
高效液相色谱在研究人工核酸酶中的应用
目的:用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定了用Cu(Ⅱ)组氨酸配合物切割DNA-二核苷酸2′-脱氧腺嘌呤(3′→5′)-2′-脱氧腺嘌呤核苷酸的产物. 方法:色谱柱Hypersil BDS C18 150 mm×4.6 mm;流动相为C:0.2 mol*L-1 磷酸二氢铵溶液(pH 5.5),B∶甲醇-水(3∶2);流速:0.85 mL*min-1;梯度为B:0 0→5 min;B:0→50% 5→17 min;B:50%→100% 17→ 18 min;B:100% 19min 停止.紫外检测波长260 nm.结果:在本文中,用HPLC检测可得到直接有效的数据.结论:本方法准确、灵敏.