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血管内皮生长因子干扰RNA对鼠视网膜中血管内皮生长因子mRNA表达的抑制作用
目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)小片段干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对鼠视网膜VEGF mRNA的抑制作用,探讨其对视网膜新生血管治疗的可行性.方法 体外培养人鼻咽癌细胞(CNE-2Z),分成正常氧培养组(20% O2)和低氧培养组(1% O2).采用脂质体(LF 2000)将VEGF siRNA转染两组细胞,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达,确立VEGF siRNA对VEGFmRNA的抑制效率.然后,建立高浓度氧(75%)诱导的C57BL./6J小鼠视网膜新生血管动物模型,以脂质体为载体,将VEGF siRNA重组质粒注射到鼠玻璃体腔内,RT-PCR检测视网膜组织中VEGF mRNA的表达水平.结果 正常氧培养的CNE-2Z细胞有VEGF mRNA表达,低氧状态下VEGFmRNA表达增多,两者之间差异有显著性(P＜0.01);与未转染组和转染空载体组相比,在正常氧和低氧状态下,VEGFsiRNA均能明显抑制VEGFmRNA的表达(P＜0.01);正常氧状态下VEGF siRNA的抑制效率比低氧状态高.高浓度氧诱导的C57BL/6J小鼠视网膜新生血管动物模型中,玻璃体腔注射VEGF siRNA组视网膜组织中VEGF mRNA表达明显下降(P＜0.01).结论 VEGF特异的siRNA能有效地抑制人鼻咽癌细胞CNE-2Z和C57BL/6J 小鼠视网膜新生血管动物模型视网膜中VEGF mRNA的表达.
关键词： RNA干扰/药物作用 血管内皮生长因子/治疗应用 视网膜 新生血管 基因治疗 -
血管内皮生长因子治疗下肢缺血性疾病的研究进展
单独使用血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗下肢缺血性疾病的研究由来已久,目前尚无满意疗效.目前已证实血管内皮前体细胞(EPC)可定向分化血管内皮细胞并能形成新生血管,其中VEGF在EPC定向分化、体内动员、体外扩增及转染EPC后定向移植治疗周围缺血性疾病等过程中发挥重要作用.笔者对VEGF在基因治疗、细胞治疗和基因转染细胞治疗下肢缺血性疾病的研究进展综述如下.
