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pDC316-HGFK1 病毒穿梭载体的构建及鉴定
[目的]构建携带人HGFK1基因的病毒穿梭载体pDC316-HGFK1.[方法]通过RT-PCR方法从人新鲜胎盘组织中扩增出HGFK1基因,构建pDC316-HGFK1病毒穿梭载体,经PCR、酶切、测序等方法进行鉴定.[结果]酶切、PCR及测序证实pDC316-HGFK1载体序列正确.[结论]成功构建pDC316-HGFK1病毒穿梭载体,可为后续病毒包装及对肝癌细胞的生物学影响研究奠定基础.
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HGFK1抗肿瘤血管生成研究进展
HGFK1是肝细胞生长因子(HGF)第一个环状结构域(K1)的基因表达产物,在临床上具有抑制细胞运动及抗肿瘤血管生成的潜在治疗作用.全文对HGFK1在抗肿瘤血管生成基因治疗上的研究现状作一综述.
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HGFK1基因真核表达载体的构建及鉴定研究
目的 构建携带人HGFK1基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HGFK1.方法 通过PCR方法从已经构建好的病毒穿梭载体中扩增出HGFK1基因,构建pcDNA3.1(-)-HGFK1真核表达载体,经PCR、酶切、测序、蛋白表达等方法进行鉴定.结果 PCR、酶切、测序以及蛋白表达证实pcDNA3.1(-)-HGFK1载体序列正确.结论 本研究成功构建了pcDNA3.1(-)-HGFK1真核表达载体,可为后续进行肝癌细胞的生物学研究提供帮助.
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双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对不同胃癌细胞抑制作用的比较
目的 比较肝细胞生长因子第一环状结构域基因(hepatocyte growth factor kringle 1,HGFK1)溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞系SGC7901、MKN45、MGC803的抑制杀伤效果.方法 以野生型腺病毒(AD5-EGFP)和空载体双靶向腺病毒(TH-AD-EGFP)为对照组,以双靶向HGFK1溶瘤腺病毒(TH-AD-HGFK1-EGFP)为试验组在感染复数(MOI)为100的条件下分别感染这三种胃癌细胞,测定其在72小时的细胞生存率状况(CCK8试验),并比较三种胃癌细胞试验组的差异.结果 试验组双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞的72小时细胞抑制率均明显高于对照组(P<0.001),MKN45试验组明显低于SGC7901和MGC803试验组(分别是P=0.004和P=0.002).而SGC7901试验组和MGC803试验组之间没有明显差别(P=0.599).结论 双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞SGC7901、MKN45、MGC803均具有抑制杀伤作用,但对SGC7901和MGC803的抑制效果明显高于MKN45.
