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锌指蛋白488文献资料
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ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响
[目的]探讨ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响.[方法]构建携带空载体、人ZNF488基因的逆转录病毒质粒pMSCV和pMSCV-ZNF488,以磷酸钙法转染293FT细胞并收集病毒液,感染鼻咽癌细胞株HONE1,经嘌呤霉素筛选及Western Blot鉴定,建立稳定表达ZNF488的HONE 1-pMSCV-ZNF488和空载体HONE 1-pMSCV的细胞株.应用噻唑盐(MTT)法、平板克隆形成实验检测ZNF488过表达对HONE1细胞生长增殖的影响,同时应用流式细胞术检测ZNF488对细胞周期增殖指数的影响.划痕实验及Transwell体外侵袭实验观察ZNF488对HONE1迁移侵袭能力的影响.Western Blot检测上皮—间质转化(EMT)相关蛋白及抑癌基因PTEN的表达情况.[结果]成功建立稳定表达ZNF488的HONE1-pMSCV-ZNF488细胞株,MTT法及平板克隆形成实验结果显示,与空载体组HONE1-pMSCV细胞相比,HONE1-pMSCV-ZNF488细胞增殖及克隆形成能力均增强.流式细胞术显示过表达ZNF488细胞S期百分比较空载体组高,增殖指数增加.划痕实验、Transwell体外侵袭实验示ZNF488能够显著增加细胞的迁移、侵袭能力.Western Blot检测发现上皮标志E-Cadherin、α-Catenin表达降低,间质性标志Fibronectin、Vimentin表达升高,同时抑癌因子PTEN表达下降.[结论]过表达ZNF488可通过诱导鼻咽癌细胞HONE1发生上皮间质转变及下调抑癌基因PTEN,促进细胞的增殖及迁移侵袭能力.
