骨髓间充质干细胞来源外泌体对烟雾吸入伤大鼠的保护作用

目的 间充质干细胞可以减轻多种原因诱导的急性肺损伤,一些研究表明间充质干细胞来源外泌体具有与母细胞相似的功能,但其对急性肺损伤的作用研究较少.文中旨在探讨骨髓间充质干细胞来源外泌体(BMSC-DEs)对烟雾吸入伤(SⅡ)大鼠的保护作用及其可能机制. 方法 30只wistar大鼠随机均分为对照组,烟雾吸入伤模型组(SⅡ组),骨髓间充质干细胞来源外泌体治疗组(BMSC-DEs组).建立大鼠SⅡ模型,12h后BMSC-DEs组经尾静脉注射0.5 mL大鼠BMSC-DEs(来源于4× 106BMSCs),对照组和SⅡ组注射等量等渗盐水,7d后收集实验标本.HE染色观察肺组织病理变化,BCA法测定肺泡灌洗液中总蛋白含量,ELISA法检测肺组织匀浆中炎性因子TNF-α及角质细胞生长因子KGF的水平,免疫组化检测肺表面活性物质相关蛋白C的表达. 结果 与对照组BALF中总蛋白[(0.164±0.021) ng/L]相比,SⅡ组[(0.355±0.106) ng/L]较高(P＜0.01);BMSC-DEs组BALF中总蛋白含量[(0.234±0.024) ng/L]低于SII组(P＜0.05).与对照组肺组织匀浆炎性因子TNF-α水平相比,SⅡ组和BMSC-DEs组明显升高(P＜0.05),且SⅡ组高于BMSC-DEs组(P＜0.01).SⅡ组肺组织匀浆KGF表达低于对照组(P＜0.05),而BMSC-DEs组KGF表达高于对照组和SII组(P＜0.05).免疫组化染色示:BMSC-DEs组和对照组SP-C表达均高于SⅡ组(P＜0.05),BMSC-DEs组和对照组间差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 骨髓间充质干细胞来源外泌体对烟雾吸入伤大鼠具有保护作用,其机制可能与外泌体减轻炎症反应和促进Ⅱ型肺泡上皮修复有关.

氯喹对烟雾吸入伤大鼠肺细胞膜ATP酶活性和丙二醛含量的影响

目的:探讨氯喹对烟雾吸入伤大鼠肺细胞膜ATP酶活性及丙二醛含量的影响.方法:80只Wistar大鼠随机分成正常对照组,烟雾吸入伤1,3,6,12和24h组以及氯喹治疗6h和12h组;分别于各时相点活杀动物,取肺制备膜制剂,用生化比色法测定膜上Na+,K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性,用比色法测定膜上丙二醛含量,并用定磷法测定膜总磷脂含量.结果:烟雾吸入伤后,肺细胞膜3种ATP酶活性从伤后1h至伤后24h均明显降低(P＜0.01),同时伴有膜丙二醛含量增加和膜总磷脂含量降低;氯喹治疗6h组Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性和总磷脂含量明显高于吸入伤6h组,而丙二醛却明显低于吸入伤6h组(P＜0.05与P＜0.01).结论:肺细胞膜磷脂分解、丙二醛含量增加和ATP酶活性降低可能是烟雾吸入伤发生发展的重要原因;氯喹部分改善ATP酶活性、降低丙二醛含量、稳定细胞膜而对烟雾吸入伤具有防治作用.

早期大容量肺灌洗对犬重度单肺吸入伤引起的对侧肺损害的影响

目的　研究大容量灌洗对犬一侧肺急性重度烟雾吸入伤引起的对侧肺损害的影响，求证早期肺灌洗减轻吸入伤犬肺继发性炎症反应的有效性。方法　建立犬左肺单侧急性重度烟雾吸入伤模型，伤后1 h对伤肺进行生理盐水大容量灌洗。观察自主呼吸24 h间灌洗组犬与未灌洗组犬双肺换气功能，比较24 h后两组犬两侧肺标本之病理学和病理生理学变化程度。结果　左肺灌注总量250 ml，简单负压吸引后单肺灌注液存留量90～140 ml。伤后立即灌洗组与未灌洗组犬PaO2均显著下降，灌洗组犬灌洗后PaO2立即进一步下降，2 h后逐渐回升，伤后24 h时已反超未灌洗组犬；两组犬左肺均呈现重度肺水肿及肺出血，右肺呈轻～中度肺水肿，灌洗组犬右肺肺水含量小于未灌洗组犬，右肺动、静态顺应性大于未灌洗组犬。结论　早期大容量灌洗可减轻犬一侧肺急性重度烟雾吸入伤时对侧肺损害程度，即有效减少了吸入伤犬肺后续炎症反应。

犬急性重度烟雾吸入伤后早期大容量肺灌洗的安全性研究

目的　探讨急性烟雾吸入伤犬早期大容量肺灌洗的安全控制问题。方法　16只杂种犬随机分成3组：A组5只，烟雾吸入伤后单纯控制呼吸支持；B组6只，吸入伤后1 h采用特殊的通气方式维持肺换气的同时，在纤支镜引导下左肺大容量肺灌洗。间隔30 min行右肺灌洗；C组5只，双肺灌洗间隔时间4 h。比较3组犬呼吸和循环系统的稳定程度。结果　每侧肺灌注总量250 ml，两组犬血流动力学数据变化趋势基本相同：吸入伤对循环有一定的负性作用，而肺灌洗的影响较小；灌注中均未出现严重的心律失常。单肺灌注操作时间15 min左右，简单负压吸引后单肺灌注液存留量100～140 ml。两组肺灌洗犬灌注中、后控制呼吸至伤后10 h，PaO2均不低于9.33 kPa（FiO2=0.4）。两肺灌注间隔4 h犬肺换气功能优于间隔30 min者而不及不灌洗犬。结论　本研究介绍的通气模式和灌洗方法可保证急性烟雾吸入伤犬早期大容量肺灌洗的安全。

PEEP对犬烟雾吸入伤早期肺血液动力学的影响

烟雾吸入伤大鼠肺组织白介素-6和α-干扰素的变化及意义

目的探讨白介素-6(IL-6)和α-干扰素(INF-α)在烟雾吸入性肺损伤发生、发展中的作用.方法建立大鼠烟雾吸入伤模型,将60只Wistar大鼠随机分成正常对照组,烟雾吸入伤1、3、6、12h和24h组,分别取血和肺测定血气参数和肺组织含水量用干湿重法,肺血管通透性用131I-白蛋白渗出量测定,TNF-α用放射免疫法测定,IL-6和INF-α用ELISA法测定.结果大鼠动脉血氧分压(PaO2)自烟雾吸入后1h起均明显低于正常对照组(P<0.01),二氧化碳分压(PaCO2)仅烟雾吸入后12h和24h明显高于正常对照组(P<0.05).肺组织含水量和131I-白蛋白渗出量自烟雾吸入后1h起均明显高于正常对照组(P<0.01),在伤后6h达峰值;肺组织匀浆TNF-α含量自烟雾吸入后1h起至伤后24h均明显高于正常对照组(P<0.01),IL-6含量自烟雾吸入后1h起至伤后12h均明显高于正常对照组(P<0.01)、伤后24h已有所恢复,INF-α含量仅伤后6h明显高于正常对照组(P<0.01).结论烟雾吸入后肺组织IL-6和INF-α含量增加,可能参与了烟雾吸入性肺损伤的发生与发展,IL-6变化更早、持续时间更长.

烟雾吸入伤大鼠肺组织抗氧化酶活性和谷胱甘肽含量变化

目的观察烟雾吸入伤大鼠肺组织抗氧化酶活性和谷胱甘肽含量变化.方法建立大鼠烟雾吸入伤模型,将60只Wistar大鼠随机分成正常对照组,烟雾吸入伤1、3、6、12h和24h组,分取肺组织测定过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量.结果肺组织匀浆CAT活性在烟雾吸入伤后3、6h明显高于正常对照组(P<0.05、P<0.01),伤后12h、24h已低于正常对照组;GSH-PX活性伤后1h已明显高于正常对照组(P<0.01), 伤后3h达峰值,伤后12、24h明显低于正常对照组(P<0.05);SOD活性和GSH含量从烟雾吸入伤后1h开始明显低于正常对照组,一直持续到伤后24h(P<0.05,P<0.01).结论烟雾吸入伤后肺组织CAT、GSH-PX活性先增后减,而SOD活性和GSH含量持续降低,反映了肺内氧应激的强度和抗氧化物质的不同作用.

氧合氟碳液早期肺灌洗对犬重度单肺吸入伤的影响--与生理盐水肺灌洗的比较

目的与生理盐水肺灌洗比较,研究评价氧合氟碳液PFC早期肺灌洗治疗犬重度单肺吸入伤的优缺点.方法建立犬左肺单侧急性重度烟雾吸入伤模型,伤后1h对伤肺进行氧合氟碳液PFC或生理盐水大容量灌洗.观察自主呼吸24h内犬双肺换气功能,肺病理和病理生理学变化程度,计算两种灌洗液的清洁效率.结果 (1)生理盐水和PFC肺灌洗均可有效清除下呼吸道,减轻吸入伤引起的原发性和继发性肺组织结构改变;(2)生理盐水灌洗犬左肺伤后24h肺功能无改善而右肺和全肺功能相对未灌洗犬有一定改善;(3) PFC肺灌洗清洁功能不及生理盐水,但灌洗犬近期肺功能显著优于生理盐水灌洗犬和吸入伤后自然演变组犬.结论早期大容量肺灌洗可有效减少吸入伤犬肺继发性炎症反应,氧合氟碳液灌洗在显示近期综合疗效方面有优越性.