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miR-1264对喉癌Hep2细胞增殖和迁移的影响
目的 miR-1264在喉癌中表达下调.文中旨在研究miR-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响及是否参与下调LCRG1基因的表达. 方法 Real-time quantitative PCR检测miR-1264在人喉癌组织中的表达情况;将转染mimic/in-hibitor NC Hep2细胞设为对照组,将未转染Hep2细胞设为空白组,将转染miR-1264 mimic/inhibitor设为实验组.利用MTT、Transwell分别观察miR-1264对Hep2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;luciferase实验验证miR-1264和LCRG13′UTR的结合;RT-PCR、Western blot分别检测miR-1264、LCRG1蛋白表达. 结果 与对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬转miR-1264 mimic后,活细胞数量明显增加,增殖能力显著增强(P<0.05);而瞬转miR-1264 inhibitor后,活细胞数量明显降低,增殖能力减弱(P<0.05).与对照组[(80.80±1.07)个]及空白组[(73.60 ±1.44)个]迁移细胞数量相比,实验组[(97.00 ±1.41)个]明显增加(P<0.05),迁移能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(80.00±1.11)个]及空白组[(73.60 ±1.44)个]迁移细胞数量相比, miR-1264 inhibitor组[(71.40±1.21)个]明显降低(P<0.05),迁移能力亦减弱(P<0.05).与对照组[(43.00±1.41)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(57.00±1.00)个]明显增加(P<0.05),侵袭能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(61.20±1.50)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(27.60±0.93)个]明显降低,侵袭能力受到显著抑制(P<0.05),利用 RT-PCR验证瞬转成功后,进一步应用 Western blot实验检测 LCRG1蛋白表达结果,显示:实验组LCRG1蛋白表达较 NC对照组和空白组均无明显差异(P>0.05). 结论 miR-1264在喉癌组织中高表达,miR-1264可能不参与LCRG1蛋白的表达下调,但能增强Hep2细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
