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Fas配体(FasL)在大鼠损伤坐骨神经中的表达及其功能研究
目的:采用分子生物学技术分析大鼠坐骨神经损伤后坐骨神经远端Wallerian溃变(Wallerian degeneration,WD)过程中,Fas配体(Fas ligand,FasL)的表达变化,并通过干扰FasL的表达分析FasL在施万细胞(Schwann cells,SCs)中的功能,探讨FasL在周围神经损伤修复与再生过程中的作用机制.方法:建立大鼠损伤坐骨神经WD模型,采用Real-time PCR和Western Blot的方法,分析FasL在大鼠坐骨神经WD过程中的表达变化,并通过培养和纯化的SCs,siRNA干扰FasL的表达分析FasL在SCs中的功能.结果:大鼠坐骨神经损伤后,在WD过程中,FasL的表达量显著升高,FasL siRNA干扰后SCs的增殖和迁移均增加,且引起SCs其他相关基因的表达变化.结论:大鼠坐骨神经损伤后,FasL的表达发生变化并影响SCs的生物学功能,提示FasL在周围神经损伤修复与再生过程中发挥了一定的作用.
关键词： Fas配体 Wallerian溃变 施万细胞 RNA干扰 基因表达 -
TLR4在大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变过程中的体内作用研究
目的:研究TLR4(Toll-like receptor4)在大鼠坐骨神经损伤后,Wallerian溃变过程中的作用,为周围神经损伤修复与再生的研究提供实验依据.方法:制备大鼠损伤坐骨神经模型;利用修饰过的TLR4基因过表达质粒导人大鼠损伤坐骨神经远端组织;通过实时荧光定量PCR和Western Blot的方法分析损伤7d、14d后基因和蛋白的表达,以及相关信号通路的变化.结果:在大鼠坐骨神经损伤7d、14d后,实时荧光定量PCR显示,远端TLR4的过表达引起Bax、Bcl-2、NF2、NT3、PKCα等基因的表达变化,Western Blot显示TLR4过表达后,p-AKT/AKT、p-c-Jun/c-Jun和p-ERK/ERK等蛋白的表达发生显著性差异.结论:TLR4在大鼠坐骨神经损伤后,Wallerian溃变过程中可能发挥了重要的调控作用.
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大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期的基因表达变化
目的:探讨Wallerian溃变早期激活神经损伤修复与再生的分子机制.方法:建立大鼠损伤坐骨神经模型,通过表达谱基因芯片和生物信息学方法,全面系统分析大鼠坐骨神经损伤后远端Wallerian溃变早期的基因表达变化,运用RT- PCR、Western Blot和Immunohistochemistry等方法验证和鉴定表达谱基因芯片分析结果.结果:大鼠坐骨神经损伤后,坐骨神经远端在Wallerian溃变早期即有1546个显著表达差异基因和21种显著性差异基因表达趋势；基因功能注释和信号通路分析显示,Wallerian溃变早期有58种信号通路被激活,形成Wallerian溃变早期的信号调控网络.结论:大鼠坐骨神经损伤后Wallerian溃变早期即有大量基因的表达变化和多种信号途径的激活,本研究可为神经损伤修复与再生提供理论基础.
关键词： 大鼠 Wallerian溃变 坐骨神经 基因芯片 信号通路
