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重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体文献资料
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毕赤酵母工程菌高密度发酵肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的研究
目的研究重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)巴斯德毕赤酵母工程菌发酵工艺.方法首先用摇瓶对工程菌的甲醇诱导周期、甲醇浓度、pH进行研究,在此基础上,采用5 L发酵罐补料培养进行中试研究.结果人可溶性TRAIL巴斯德毕赤酵母茵在pH 6.0、甲醇诱导浓度1%的条件下诱导96 h,目标蛋白质浓度高,可达72.8 mg/L.5 L发酵罐培养放大,可以达到184 mg/L.结论此发酵工艺可以较好地提高人可溶性TRAIL工程菌的分泌表达.
关键词： 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 毕赤酵母 发酵 -
重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTRAIL)质控方法和质量标准的研究
目的:建立重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTRAIL)的质控方法和质量标准.方法:以NCI-H460细胞毒实验测定rhTRAIL的生物学活性,还原型SDS-PAGE确定相对分子质量,SDS-PAGE和反相高效液相色谱测定纯度,毛细管电泳法测定等电点,用胰蛋白酶酶切后分析肽图,其余检测项目按<中国生物制品规程>2000版规定进行.结果:用建立的方法对rhTRAIL原液和成品各1批进行了检定,各项指标均符合<人用重组DNA制品质量控制技术指导原则>和<中国生物制品规程>的要求.结论:建立的质控方法和质量标准具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,可用于重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTRAIL)产品的常规检定.
关键词： 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 质量控制 生物学活性
