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  • 非转移性黑素瘤糖蛋白基因沉默抑制黑素小体形成的机制探讨

    作者:张萍;李铀;袁小英;李东光;刘玮

    目的:探讨非转移性黑素瘤糖蛋白[glycoprotein (transmembrane) nonmetastatic melanoma proteinb,GPNM]B 基因沉默抑制黑素小体形成的作用机制.方法:以黑素细胞系PIG1 为研究对象,采用小干扰RNA(siRNA)干扰法下调GPNMB 基因的表达,以实时定量反转录(RT)-PCR 和Western blot 法检测GPNMB-siRNA 转染对GPNMB、酪氨酸酶(Tyr)、酪氨酸相关蛋白1(Trp1)、OA1 和Pmel17 的影响,进一步采用Tyr-siRNA 转染PIG1 细胞下调Tyr 基因的表达以验证GPNMB 与Tyr 之间的相互作用,并检测GPNMB 基因沉默对小眼畸形相关转录因子(MITF)的影响.结果:GPNMB-siRNA 转染对GPNMB、Tyr、Trp1、Pmel17 和OA1 等黑素小体蛋白的表达均有显著抑制作用;GPNMB 与Tyr 之间无相互作用;GPNMB-siRNA 转染或中波紫外线(UVB)单独作用能够上调MITF 的表达,但两者共同作用却能显著抑制MITF 的表达.结论:GPNMB 基因沉默对黑素小体形成的抑制作用不依赖于MITF.

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