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垂体肿瘤转换基因1与皮肤相关疾病的研究进展
随着全基因组关联分析等技术的广泛应用,逐渐发现许多复杂性皮肤病的相关易感基因,能更好地解释其发病机制.垂体肿瘤转换基因1是一种常见的原癌基因,在许多肿瘤的发生和发展中起到一定作用.垂体肿瘤转换基因1也称为分离酶蛋白抑制基因,其编码产物为细胞周期调节蛋白,在细胞分裂周期中参与调节姐妹染色单体的分离和细胞周期由中期向后期的过度.同时,垂体肿瘤转换基因1的过度表达也可促进上皮细胞的增生和干扰细胞的分化,进而参与银屑病、皮肤鳞状细胞癌等疾病的发生.另外,该基因也能通过调节干扰素通路而参与系统性红斑狼疮的发病.
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RNAi技术干扰人喉癌Hep-2细胞PTTG1基因的初步研究
目的:探索对人PTTG1基因mRNA序列有较高干扰效率的位点,构建对PTFGl基因的表达有较高抑制效率的重组质粒.方法:筛选、合成1对互补 DNA单链,退火为双链后与双酶切后的质粒载体连接,构建了表达短发夹RNA的1种重组质粒plk0.1-puro/PTTG1.重组质粒以不同浓度转染,并于转染后不同时间收集细胞,以β-actin为内参,采用RT-PCR和Western blot技术分别检测PTTG1基因的mRNA、蛋白质的相对表达水平.结果:与空白对照组相比,6孔板中每孔转染质粒plk0.1-puro/PTTG1 1 000 ng以上、转染超过12 d时,PTTG1基因mRNA、蛋白质的相对表达水平下降70%以上.结论:重组质粒plk0.1-puro/PTTG1,在6孔细胞培养板中以1 000 ng/孔转染12 d以上时,有效抑制了PTTG1人基因的表达,在关于PTTG1基因的研究中具有较好的应用价值.