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甘肃地区汉族人群FcεRI基因启动子区多态性与青霉素过敏的关联性分析
目的 探讨高亲和力IgE受体(FcεRI)基因启动子区多态性(MS4A2 rs1441586和FcεRIG rs11587213)与青霉素过敏的相关性.方法 以甘肃地区汉族人群200例青霉素过敏患者和210例对照为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测MS4A2 rs1441586和FcεRIG rs11587213两位点基因型及等位基因的分布频率,并通过测序进行验证.结果 过敏组MS4A2 rs1441586位点基因型频率与对照组相比差异无统计学意义(X2=5.497,P＞0.05),过敏组C等位基因频率为35.8％,高于对照组的29.3％(X2=3.906,P＜0.05);按性别分组后其基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义;按年龄分组后,非老年人群中过敏组基因型分布频率与对照组相比差异有统计学意义(X2=5.908,P＜0.05).过敏组FcεRIG rs11587213位点基因型频率与对照组相比差异无统计学意义(X2=5.526,P＞0.05),过敏组G等位基因频率为7％,高于对照组的3.6％(X2=4.847,P＜0.05);按性别分组后,男性过敏组与对照组基因型及等位基因频率分布差异仍有统计学意义(X2分别为8.649、4.294,P均＜0.05);按年龄分组后,老年人群中两组间差异有统计学意义(X2分别为7.637、5.550,P均＜0.05).结论 FcεRI基因启动子区多态性可能与甘肃地区汉族人群青霉素过敏反应相关,MS4A2 rs1441586与非老年人青霉素过敏高度关联,FcεRIG rs11587213与男性以及老年青霉素过敏患者高度关联.
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高亲和力IgE受体介导的信号传导及其相关的抑制性受体
作者介绍了高亲和力IgE受体介导I型超敏反应,其活化后的信号传导通路,及其相关的抑制性受体方面的研究进展,包括FcγRIIβ、PIR-B、SIRPα、CD81及MAFA.对高亲和力IgE受体介导的信号通路和其相关的抑制性受体的研究将有可能发现对抗Ⅰ型超敏反应的新靶点,从而有助于过敏相关疾病的治疗.
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高亲和力IgE受体α链cDNA的克隆及序列测定
目的:为获得编码高亲和力IgE受体(FcεR1)α链的 cDNA序列.方法:从正常人外周血中富集嗜碱性粒细胞,提总RNA进行RT-PCR,分子克隆,用自动测序及放射自显影测序.结果:分离并鉴定了该cDNA重组子,在159密码子及185密码子分别发现了CAC→CGC与TAT→CAT置换 .结论:建立了一个编码FcεR1膜外区α链的cDNA重组子克隆,它不含引导肽序列,可能是一个来自中国人的该基因的变异体.
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脐血CD34+干细胞体外诱导树突状细胞的表型特征及其影响因素分析
目的 建立脐血CD34+干细胞体外诱导树突状细胞(DC)的培养体系,并观察IgE受体和Toll样受体的表达特征及其影响因素.方法 无菌条件下常规采集脐血,采用梯度离心试剂和全自动磁性活化细胞分选仪(autoMACS)分离CD34+肝细胞并培养,每4天半量更换含有重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和TGF-β的培养基,隔日加入1 ng/ml的人骨髓瘤IgE(myeloma IgE,mIgE).于培养不同时段收获细胞,利用单克隆抗体和流式细胞术对诱导细胞亚群检测CD1a、CD14、Langerin、FcεR Ⅰ、FcεRⅡ和TLR的表达.结果 体外诱导培养4d后可观察到典型的树突状细胞,不同质量浓度的TGF-β可影响细胞Langerin、FcεR Ⅰ和TLR2的表达；Langenn的表达主要限于CD1a+和CD14C+D1a(DP)细胞亚群,FcεR Ⅰ和TLR2在不同的细胞亚群均有表达,以CD14+、DP和CD1a+细胞亚群中表达水平较高,不同类型的细胞群不同程度地表达CD1a、Langerin、FcεR Ⅰ、FcεRⅡ和TLR2.结论 利用GM-CSF、TGF-β和mIgE可诱导脐血CD34+干细胞分化为表达FcεR Ⅰ和TLR2受体的DC,TGF可调节2种受体表达水平.
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人外周血单核细胞源性朗格汉斯细胞和表皮炎症样树突状细胞的诱导及表型分析
目的 利用人外周血单核细胞体外诱导培养朗格罕氏细胞(Mo-LC)和炎症性树突状表皮细胞(Mo-IDEC)并观察其表型特点.方法 联合应用LymphoPrepTM梯度离心试剂和CD14+磁珠分离和筛选外周血 CD14+单核细胞；在重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组人白介素4(IL-4)的基础上分别于第0、2、4天加入人天然TGF-β1或β-巯基乙醇(β-ME).培养第6天时收集细胞,通过相差显微镜观察其形态,并利用单克隆抗体和流式细胞术对诱导细胞亚群检测细胞表面分子的表达水平.结果 CD14+单核细胞体外诱导培养6d后可形成具有树突状外观的Mo-LC和Mo-IDEC,2种细胞均不同程度表达CD1a、FcεRI、FcεRII、TLR1、TLR2；Mo-LC表达CD207,Mo-IDEC表达CD206.特应性皮炎患者来源的Mo-IDEC表面CD1a表达高于Mo-LC,且CD23、TLR2、FcεRI的表达水平显著高于健康对照组.结论 利用外周血单核细胞可在体外成功诱导Mo-LC和Mo-IDEC,这2种细胞表型特点与体内分离的细胞在形态和表型上类似,为体外进一步研究这2类细胞的功能打下基础.
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高亲和力IgE受体β链基因与儿童哮喘的相关性研究
目的研究FcεR Ⅰ-β的I181L、V183L和E237G突变在四川地区11岁以下汉族儿童中的存在和频率,判断这些突变与儿童哮喘的相关性.方法利用扩增阻滞突变系统聚合酶链技术(ARMS-PCR)对四川地区的48例汉族哮喘儿童进行FcεR Ⅰ-β的181、183、237三个位点的突变进行检测和分析,并与40例健康儿童进行对照.结果在哮喘组中检测到Ⅰ 181L突变5例(10.4%),V 183L突变2例(4.2%),E 237G突变6例(12.5%),在对照组中未发现Ⅰ181L、V 183L、E 237G突变子.结论四川地区汉族儿童中存在Ⅰ 181L、E 237G突变,不存在V 183L突变或突变率极低.Ⅰ 181L突变与哮喘存在相关性(P＜0.05),E 237G突变和哮喘有相关性(P＜0.025),而V 183L与哮喘不存在相关性(P＞0.05).
