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羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后血管内皮生长因子及血管细胞黏附分子-1表达的作用
目的 观察羊膜匀浆提取液(amniotic membrane extract,AME)对角膜碱烧伤后不同时期血管内皮生长因子(VEGF)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在角膜表达的作用,初步探讨AME抑制角膜新生血管(CNV)形成的机制.方法 SD大鼠36只,中度碱烧伤法建立角膜碱烧伤动物模型,随机分成AME低浓度A组、中浓度B组、高浓度C组和对照组,每组9只.A、B、C三组分别予以80、160、320 mg/L AME滴眼,对照组行磷酸盐缓冲液(PBS)滴眼.分别于碱烧伤后每天裂隙灯下观察CNV情况,并于7、14、28 d计算CNV面积,角膜HE染色观察角膜病理改变,免疫组化法检测角膜组织中VEGF及VCAM-1的阳性表达率.结果 角膜HE染色显示,大鼠角膜碱烧伤后,各时间点A、B、C三组角膜水肿情况、角膜溃疡及CNV均较对照组减轻,且C组好于B组,B组好于A组.大鼠角膜碱烧伤后各时间点CNV面积,A、B、C三组均明显小于对照组(P均＜0.05),且随AME剂量增加而减少,各组间两两比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).各时间点,A、B、C组VEGF和VCAM-1阳性表达率均明显低于对照组(P均＜0.05),且随AME剂量增加而减少,各组间两两比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 AME对角膜碱烧伤后CNV的形成具有抑制作用,且随AME剂量增加,抑制作用增强.其可能机制是AME抑制了角膜碱烧伤后VEGF及VCAM-1在角膜的表达.
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人羊膜匀浆提取液治疗眼表疾病的基础研究进展
人羊膜匀浆提取液治疗眼表疾病是近几年来发展较快的一项眼科技术.羊膜匀浆提取液比羊膜移植术使用更加方便快捷.在眼表疾病的基础研究中应用广泛.本文就羊膜匀浆提取液的制备,理化性质以及眼表疾病的应用进展作一综述.
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共聚焦显微镜观察人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响
目的：通过角膜共聚焦显微镜活体动态观察人羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后角膜超微结构的影响，探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤后的临床价值及作用机理。方法 SD大鼠40只（40只眼），通过1 mol/L的氢氧化钠（ NaOH）溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。随机分为实验组和对照组，实验组行人羊膜匀浆提取液（ AM）点眼，每日4次，对照组用PBS液点眼，每日4次。碱烧伤后行共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜各层细胞数量以及形态的变化。结果实验组角膜上皮层炎症细胞形成晚，数量较少；基质层纤维结构排列较为规则，肌成纤维细胞的增殖和激活较少、角膜新生血管数量少，管径细。结论新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效促进大鼠碱烧伤后角膜上皮细胞的增殖，抑制炎症细胞浸润，减少角膜新生血管的形成，抑制成纤维细胞的激活和增殖，减少角膜瘢痕的形成，有利于碱烧伤后大鼠角膜的透明愈合。
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前节相干光断层扫描观察羊膜匀浆提取液对兔眼滤过手术疗效的影响
目的 通过眼前节相干光断层扫描(AS-OCT)观察羊膜匀浆提取液对兔滤过手术疗效的影响,探讨羊膜匀浆提取液对结膜瘢痕的抑制作用,以及前节OCT在滤过泡观察中的临床应用价值.方法 新西兰白兔20只,随机分为对照组和羊膜匀浆液(AM)组.均取右眼行标准小梁切除术.术后A组行氯霉素滴眼液点眼,B组行AM点眼.通过前节OCT观察两组滤过泡形成情况,以及眼压的变化.结果 滤过术后7、14、28 d,AM组的眼压明显低于对照组,术后14、28 d,AM组功能性滤过泡的有效率明显高于对照组.结论 新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效抑制结膜瘢痕形成,促进功能性滤过泡的形成,有效减低眼压.而前节OCT活体动态观察滤过泡内部结构图像清晰、客观稳定.
关键词： 羊膜匀浆提取液 眼前节光学相干断层扫描 青光眼滤过术 -
羊膜匀浆提取液与羊膜移植对大鼠碱烧伤后新生血管抑制作用的比较
目的 比较羊膜匀浆提取液和羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的影响.方法 SD大鼠30只随机分为三组,每组10只.使用3 mm直径圆形滤纸片浸入1 mol·L-1,NaOH溶液中60 s后放置于大鼠角膜中央建立右眼角膜碱烧伤模型.A组行PBS(磷酸缓冲盐溶液)液点眼,B组行羊膜移植术,C组行AM(羊膜匀浆提取液)点眼.通过裂隙灯显微镜观察三组的角膜新生血管情况.结果 碱烧伤后11 d,三组的角膜新生血管面积分别为(49.12±2.05)、(35.17±1.95)、(34.04±1.37)mm2.B、C两组的新生血管面积比A组显著减少(qA、B=15.59,P A、B<0.001,qA、C=19.340 6,PA、C<0.001),而B、C组之间没有显著性差异(q=1.499 4,P>0.05).结论 新鲜人羊膜匀浆提取液与羊膜移植均能有效减少角膜新生血管形成.
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塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管面积及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响
目的 比较塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管(comeal neovascularization,CNV)面积及基质金属蛋白酶-2(matrix metallo-proteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,为临床上塞来昔布治疗CNV提供理论依据.方法 建立36只兔角膜热烧伤动物模型,随机分为3组:阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组,每组12只,8只用于观察,4只用于取材.各组兔均于造模后第1天开始球结膜下注射,至造模后第14天;阴性对照组注入90g· L-1生理盐水0.1 mL,羊膜匀浆提取液组注入羊膜匀浆提取液0.1 mL,塞来昔布组注入8 mg·mL-塞来昔布溶液0.1 mL.对比热烧伤后4d、7d、14 d在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况,并测算CNV面积;各组均于热烧伤后第7天随机取4只兔完整角膜,行免疫组织化学染色并用计算机图像分析系统检测MMP-2、MMP-9的表达.结果 角膜热烧伤后第4天,阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组都可见不同程度的角膜水肿,角膜缘血管充血扩张,新生的小血管芽呈毛刷状,垂直角膜缘切线向内生长.热烧伤后4d、7d、14 d,CNV面积阴性对照组为(11.32±1.11)mm2、(38.49±4.64)mm2、(43.30±4.39) mm2;羊膜匀浆提取液组为(9.69±1.30) mm2、(31.15±4.85) mm2、(37.19±5.27) mm2;塞来昔布组为(8.47±1.20) mm2、(30.31±4.93) mm2、(36.69±3.54)mm2.热烧伤后4d、7d、14 d,阴性对照组的CNV面积均明显大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);羊膜匀浆提取液组的CNV面积与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).热烧伤后第7天MMP-2和MMP-9表达阴性对照组大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);羊膜匀浆提取液组与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P ＞0.05).结论 塞来昔布与羊膜匀浆提取液均能有效抑制角膜热烧伤后新生血管的生长,可能与其抑制MMP-2、MMP-9在热烧伤后角膜中的表达有关.
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羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜瘢痕形成的抑制作用
目的 观察大鼠角膜碱烧伤使用羊膜匀浆提取液(extraction of amniotic membrane,EAM)后角膜瘢痕的变化,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤的临床价值及作用机理.方法 取SD大鼠40只随机分为EAM组(20只)和对照组(20只),所有大鼠通过1 mol·L-1的NaOH溶液建立右眼角膜碱烧伤模型.EAM组行EAM滴眼,每天4次,对照组用PBS缓冲液滴眼.通过裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜透明性,角膜共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜超微结构的变化,计算肌成纤维细胞的数量.结果 碱烧伤后28 d,EAM组的角膜透明度评分明显好于对照组,两组分别为2.36±0.81和3.36± 1.12(P＜0.01).碱烧伤后第9天、第11天、第14天EAM组肌成纤维细胞密度均小于对照组,各时间点EAM组、对照组分别为(201±39)个·mm-、(291±48)个·mm-2,(248±84)个·mm-2、(349±105)个·mm-2,(108±57)个·mm-2、(175±62)个·mm-2,两组之间差异均有统计学意义(均为P＜0.01).结论 新鲜EAM可以有效抑制碱烧伤后肌成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成.
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羊膜匀浆提取液抑制兔角膜新生血管及超微结构的研究
目的:观察羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后抑制角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)以及对角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液(amniotic membrane,AM)临床应用的合理浓度.方法:SD大鼠40只40眼,通过1mol/L的NaOH建立角膜碱烧伤模型.对照组(A组)行PBS液点眼4次/d,其余三组(B、C、D组)分别行240,400,560μg/mL的AM点眼.通过裂隙灯显微镜记录并比较四组角膜新生血管的生长情况.角膜共聚焦显微镜动态观察损伤后角膜的超微结构.结果:损伤后的各个时间点,C组的角膜新生血管面积与A、B两组均有显著性差异(P<0.05),即随着羊膜匀浆提取液浓度的增加,其抑制角膜新生血管的作用增强.但是C、D两组之间的CNV面积差异无统计学意义.角膜共聚焦显微镜观察发现,羊膜匀浆提取液治疗组的多形核细胞浸润明显少于对照组.结论:羊膜匀浆提取液对碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用呈剂量依赖性,但当浓度达到400μg/mL,其对角膜新生血管的抑制作用趋于稳定.这可能部分与羊膜匀浆提取液抑制碱烧伤炎症反应有关.
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人羊膜匀浆提取液抑制大鼠角膜碱烧伤后新生血管生成
目的:研究人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管形成过程中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)和血管内皮生长因子(vascular-endothelial growth factor,VEGF)的表达影响及对角膜新生血管的抑制作用.方法:SD大鼠54只建立双眼角膜碱烧伤模型,随机分为3组:A组为3g/L氧氟沙星滴眼液组,B组为10g/L泼尼松龙滴眼液组,C组为新鲜人羊膜匀浆提取液组,并分别于治疗后不同时间点进行角膜新生血管增生情况观察,HE染色病理学观察,免疫组化行VEGF和PEDF的表达检测.结果:B,C组比A组新生血管增生少,多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)浸润程度轻,VEDF表达水平显著降低,但B,C两组之间VEDF表达无显著性差异(P＞0.05).C组PEDF表达水平显著高于A,B组(P＜0.01),但A,B之间PEDF表达无显著性差异(P＞0.05).结论:新鲜人羊膜匀浆提取液能减少碱烧伤后角膜组织中PMN浸润,增强角膜组织PEDF的表达水平.
