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转ZmC1基因文献资料
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茎环法对转ZmC1基因丹参毛状根中microRNA表达分析
目的:对转ZmC1基因丹参毛状根C1-3株系中8个microRNAs(miRNAs),即miR164b、miR166a、miR166b、miR171a、miR171b、miR172、miR394和miR397进行表达定量分析.方法:以野生型丹参毛状根为对照,采用茎环法(Stem-loop),针对每个miRNA设计3条引物,包括一条特异性反转录引物、一条上游引物和一条通用反向引物.每个miRNA单独反转录,实时荧光定量PCR(qPCR)检测转基因丹参毛状根C1-3中8个miRNA的表达,实验数据用△△Ct法进行分析.结果:与野生型丹参毛状根相比,在转基因毛状根C1-3中8个miRNA均表现为不同程度的上调,其中miR394、miR397和miR164为显著,分别为对照的15.14倍、7.31倍和4.82倍.结论:茎环法可以成功应用于检测丹参中miRNA的表达;C1-3中这几个miRNA转录水平上调可能与ZmC1异源表达引起的有效成分含量及形态发育表型变化相关.
