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慢性乙型肝炎患者炎症相关差异表达基因cDNA文库的构建和筛选
目的筛选慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者与无症状乙型肝炎病毒携带者(asymptomatic HBV carriers, ASCs)表达差异的基因.方法分离CHB及ASCs的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)并提取RNA, SMART 技术合成cDNA,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建差异表达基因cDNA 文库,进一步采用dot blot筛选,得到差异表达的基因.结果经过筛选共获得了22个阳性克隆,通过序列分析,发现它们代表22个基因,在CHB表达增高的基因多是和炎症相关,在ASCs表达增高的基因中,多为新基因.结论成功构建了CHB与ASCs的消减文库并初步分析这些差异表达基因的意义,对于阐明CHB的发病机制及其治疗都有重要意义.
关键词: 慢性乙型肝炎 无症状乙型肝炎病毒携带者 抑制消减杂交 -
对无症状乙型肝炎病毒携带者实施健康教育的体会
目的 了解ASC对乙型肝炎疾病知识的认知现状,掌握对其实施健康教育的重点内容.方法 采用自行设计问卷的方法,对84例无症状乙型肝炎病毒携带者进行调查.结果 ASC普遍存在心理问题,通过个体化、有重点的健康教育,84例ASC的按期复诊率达到100%;乙型肝炎疾病知识的总知晓率由初次的32%上升到94%.结论 要格外重视对ASC的心理护理;提高ASC的健康知识依从性.要全民共同努力,来提高ASC的生活质量.
关键词: 无症状乙型肝炎病毒携带者 健康教育 体会 -
无症状乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞穿孔素基因表达
目的:检测无症状乙型肝炎病毒携带者(ASCs)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin )在相应人群中的表达.方法:分离43例ASCs和41例正常对照者的外周静脉血单个核细胞(PBMC)并提取RNA, 做定量RT-PCR检测.结果:穿孔素在HBV 携带者中表达水平是正常对照的3.58倍. 结论:穿孔素基因在ASCs高表达,对于阐明ASCs的发病机制有重要意义.
关键词: 无症状乙型肝炎病毒携带者 抑制消减杂交 定量RT-PCR