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婴幼儿急性下呼吸道感染和支气管哮喘抗肺炎支原体、肺炎衣原体和RSV抗体检测分析
目的 探讨抗肺炎支原体Mp抗体、抗肺炎衣原体CP抗体和呼吸道合胞病毒RSV抗体检测对婴幼急性下呼吸道感染ALRI和支气管哮喘的诊断意义.方法 采用间接免疫荧光法IIF检测115例婴幼ALRI患者(毛细支气管炎46例.非典型性肺炎69例)、31例支气管哮喘患者和40例对照组血清抗MP抗体、抗CP抗体和抗RSV抗体并对其结果进行回顾性分析.结果 ①观察组血清抗MP抗体阳性率高为37.67%抗CP抗体阳性率低为21.23%与对照组相比差异有统计学意义(χ2=15.77、7.74P均<0.01);抗MP抗体阳性率明显高于抗CP抗体(χ2=9.49,P<0.01)②抗RSV抗体在支气管哮喘和毛细支气管炎中阳件率高分别为54.4%和34.78%抗MP抗体阳性率在非典型性肺炎中高为42.03%.③各年龄段血清抗MP抗体和抗CP抗体阳性率在1～3岁组高分别为48.57%和22.86%;抗RSV抗体阳性率在30d～1岁组中高为38.78%.④对观察组婴幼患者检测抗MP、CP和RSV抗体分别进行了单项指标的诊断实验评价抗MP抗体的敏感性和真实性高为37.67%和50.00%.结论 抗MP抗体、抗CP抗体和抗RSV抗体的检测是婴幼ALRI和支气管哮喘诊断中重要参考指标其检测对病因诊断、治疗均有重要意义.
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人源化抗RSV病毒抗体在CHO-S细胞中的高效表达
为了有效预防及治疗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染引起的疾病,在CHO-S细胞中表达了人源化抗RSV病毒抗体.以pCHO1.0为载体,分别通过EcoR V(5')和Pac Ⅰ(3')、Avr Ⅱ(5')和BstZ17 Ⅰ(3')双酶切,将轻、重链克隆进载体,采用电转的方法,将构建好的质粒转染进CHO-S宿主细胞,通过嘌呤霉素和甲氨蝶呤压力筛选以及有限稀释法,获得能稳定表达抗体的单克隆细胞株.在摇瓶中进行仅补加葡萄糖的流加培养试验,CHO-S细胞在培养7d时活细胞密度达到大,为1.3× 107 cells/ml,在培养12d时细胞活性降低至80％以下,结束培养,终抗体表达水平达到130 mg/L,上清液中抗体总活性达到2.90×105IU/ml.经蛋白A亲和色谱纯化,抗体纯度达到98％以上.
关键词： 抗呼吸道合胞病毒抗体 CHO-S细胞 表达
