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过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因文献资料
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小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因克隆及其真核细胞表达产物鉴定
目的克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体(PPAR)γ2基因并经真核细胞短暂表达系统表达,然后对表达产物进行鉴定.方法采用RT-PCR方法从中国昆明小鼠附睾脂肪垫总RNA中扩增出PPARγ2 cDNA全长基因,亚克隆入载体pcDNA3中,形成重组载体pcDNA3/小鼠PPARγ2,对其进行测序后,在真核细胞COS-7中进行短暂表达,并用免疫荧光染色法及Western印迹法对其表达产物进行鉴定.结果克隆出中国昆明小鼠PPARγ2基因,其cDNA序列与Genbank的小鼠PPARγ2基因序列基本相同,仅在383位氨基酸由Asn(AAC)变成了Ser(AGC).经鉴定小鼠PPARγ2基因有效地在真核细胞COS-7中获得了表达.结论本研究为进一步研究PPARγ2的功能提供了实验基础.
关键词: 分子克隆 表达 过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因