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乙型肝炎病毒X蛋白与细胞色素C氧化酶Ⅲ的特异性结合
目的 探讨HBV X蛋白与细胞色素c氧化酶Ⅲ(COXⅢ)之间的结合作用.方法 采用交合实验验证HBV X蛋白和COXⅢ在酵母细胞内的结合作用,利用离体结合实验证实两者在体外的结合作用,采用免疫共沉淀实验证实两者在哺乳动物细胞中的结合作用.结果 携带COXⅢ基因的酵母与携带X基因的酵母交合后发生反应,β-半乳糖苷酶(LacZ)活性检测菌落呈现蓝色,离体结合实验Western印迹中出现特异性结合活性反应条带,提示X蛋白和COXⅢ在体外存在直接相互作用,免疫共沉淀实验在相对分子质量为17 000处出现蛋白条带,提示在哺乳动物细胞水平仍能检测到X蛋白和COXⅢ的特异结合.结论 COXⅢ与X蛋白在原核细胞和哺乳动物细胞中均存在特异性结合,HBV可能通过此反应干扰线粒体呼吸链功能及能量代谢过程.
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结直肠癌中COX Ⅰ和COX Ⅲ的表达及临床意义
目的 观察线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome coxidase Ⅰ,COX Ⅰ)和线粒体细胞色素C氧化酶Ⅲ(cytochrome coxidase Ⅲ,COX Ⅲ)在正常结直肠黏膜、结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和结直肠癌组织中的表达,探讨COX Ⅰ和COX Ⅲ在结直肠癌早期诊断中的作用以及二者与结直肠癌患者预后的关系.方法 采用免疫组化SP法检测20例结直肠正常黏膜、20例结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和80例结直肠癌组织中COX Ⅰ和COX Ⅲ的表达,并分析二者表达与结直肠癌临床病理特征及患者预后的关系.结果 COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜中的阳性率分别为75.0％(15/20)和70.0％(14/20),在结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)组织中的阳性率为35.0％(7/20)和25.0％(5/20),在结直肠癌组织中的阳性率为36.2％(29/80)和26.2％ (21/80);COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜和结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)中的阳性率差异有统计学意义(x2=6.465,P=0.011;x2=8.120,P=0.004),COX Ⅰ和COX Ⅲ在正常结直肠黏膜和结直肠癌组织中的阳性率差异有统计学意义(x2 =9.75,P=0.002;x2=13.46,P＜0.001).COX Ⅰ的阳性率与结直肠癌组织学分级、临床分期相关;组织学分级越低,COX Ⅰ阳性率越高,Ⅲ+Ⅳ结直肠癌组中COX Ⅰ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ组.COX Ⅲ的阳性率与结直肠癌临床分期相关,Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌组中COX Ⅲ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ期组.Kaplan-Meier生存分析表明COX Ⅰ和COX Ⅲ表达与结直肠癌患者预后相关(P =0.008,P=0.017).结论 COX Ⅰ和COX Ⅲ高表达与结直肠癌组织学分级、临床分期、预后密切相关,联合检测二者表达可作为结直肠癌早期诊断及判断其生物学行为的重要指标.
