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PIAS1调控炎症微环境诱导的胃癌上皮-间质转化的实验研究
背景:作为炎症网络调控的重要介质,STAT活化抑制蛋白1( PIAS1)在胃癌组织中低表达,并与疾病进展相关,但具体机制还有待研究。目的:探讨PIAS1对炎症微环境下胃癌上皮-间质转化( EMT)的影响。方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-null并转染胃癌细胞株SGC-7901,以RT-PCR法和蛋白质印迹法分别验证PIAS1 mRNA和蛋白表达。随后将SGC-7901细胞分为IL-6治疗组、Ad5/F35-PIAS1﹢IL-6治疗组、Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组,以MTT法测定细胞增殖率,细胞划痕实验和Transwell侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法测定E-cadherin、Snail、Twist、Vimentin、P-p38MAPK 蛋白表达。结果:转染 Ad5/F35-PIAS1可明显上调 SGC-7901细胞中PIAS1 mRNA和蛋白表达。与IL-6治疗组和Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组相比,Ad5/F35-PIAS1﹢IL-6治疗组细胞增殖率、细胞迁移和侵袭能力均显著下降( P﹤0.01),Snail、Twist、Vimentin、P-p38MAPK蛋白表达显著降低(P﹤0.01),E-cadherin蛋白表达显著增高(P﹤0.01)。而IL-6治疗组和Ad5/F35-null﹢IL-6治疗组上述指标相比差异均无统计学意义( P﹥0.05)。结论:PIAS1可抑制胃癌细胞在炎症微环境下发生的EMT,进而可能在抑制肿瘤侵袭与转移的过程中发挥重要作用。
关键词: 胃肿瘤 上皮-间质转化 炎症微环境 活化STAT的蛋白抑制物 白细胞介素6 -
信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达
目的 探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达.方法 以18周龄雌性MRL/Ipr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组.分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,司时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现.结果 MRL/Ipr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05).MRL/Ipr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常.MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别.结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组.