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实时相对定量逆转录聚合酶链反应文献资料
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结直肠癌患者外周血基因表达分析中参照基因的选择
目的 筛选结直肠癌患者全血样本的合适内参照基因.方法 以ACTB、GAPDH、GUSB、UBC、B2M、PBGD和18S rRNA为候选基因,用实时相对定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)稀释法检测其在8例结直肠癌患者和8名健康人全血中的表达水平,再用geNorm和NormFinder程序及两样本均数t检验评价候选参照基因的稳定性,探寻应用于结直肠癌患者全血基因表达检测的合适参照基因.结果 geNorm评估发现,适合的参照基因是ACTB、GAPDH和GUSB;NormFinder计算结果 认为GAPDH稳定性好,B2M、ACTB和GUSB次之,推荐的参照基因组合是GAPDH和B2M;候选基因表达水平的组间比较(结直肠癌组和健康组)发现,除ACTB、GUSB和UBC之外,其他候选参照基因在组间表达差异有统计学意义.结论 PBGD和18S rRNA不是结直肠癌全血样本的合适参照基因,而ACTB和GUSB是相对可以接受的参照基因.
关键词： 参照基因 基因表达 实时相对定量逆转录聚合酶链反应
