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流式细胞仪检测白细胞胞浆内抗原髓过氧化物酶的实验研究及其应用
目的 评价流式细胞仪检测胞浆内抗原髓过氧化物酶(MPO)的方法,探讨实验中各因素对检测结果的影响.方法 以HL-60细胞为模型,多参数流式细胞仪分析,比较FACS、Fix & Perm、Fixation & Permeabilization 3种破膜剂处理及不同处理时间、不同荧光染料对实验结果的影响.检测正常人和急性白血病患者的MPO表达情况.结果 FACS破膜剂对细胞的前向散射角/侧向散射角(FSC/SSC)影响小,相对荧光强度(RFI)明显高于其他两者.3种破膜剂在破膜时间15 min时均可达到佳效果.藻红蛋白(PE)标记的MPO抗体在荧光强度上明显优于异硫氰酸荧光素(FITC).41例初发急性白血病患者和20例非白血病患者骨髓检测结果证实,MPO为急性髓系白血病诊断中为敏感的髓系抗原.结论 流式细胞仪检测MPO的标准推荐方法:应用FACS破膜剂15 min,标本必须当天完成检测,尽量采用PE标记的MPO抗体.MPO对急性白血病的诊断和分型非常重要.
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胞浆抗原检测在急性双表型白血病中的诊断价值
目的探讨胞浆抗原检测在急性双表型白血病(BAL)中的临床诊断、鉴别诊断价值.方法采用流式细胞术(FCM)对500例初治急性白血病(AL)患者,统一进行常规一线抗体的检测,其中对一线抗体诊断不清的80例加做二线胞浆抗原染色.结果 80例加做胞浆抗原检测后,依据EGIL(1998年)积分系统,符合BAL有10例(10/500例,2.0%):T系/B系双表型3例(cCD3、cCD79a双阳性)、T系/髓系双表型3例(cCD3、MPO双阳性)、B系/髓系双表型4例(cCD79a、MPO双阳性);符合急性未分化型白血病1例(0.2%);符合AL伴系表达69例.结论对诊断不清的AL病例,加做胞浆抗原检测,对进一步提高白血病的诊断水平,特别是对未分化型、双表型以及双表型的分类诊断、双表型与伴系表达白血病的鉴别诊断具有重要价值.
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两种不同的渗透剂对髓过氧化物酶测定的比较分析
在白血病免疫分型中,胞浆抗原的检测,如髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、胞浆CD22(Cy-CD22)及胞浆CD3(CyCD3)等,因其特异性强、灵敏度高等优点对确定白血病细胞的系别起源具有重要作用[1、2].但也应注意到,用于检测胞浆内抗原的渗透剂及方法对结果会产生很大影响,选择不当会导致结果出现很大的偏差.本文就两种不同的渗透剂对MPO检测的影响做了配对比较分析.
