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HSVl-tk/GCV基因治疗系统的旁观者效应观察
探讨逆转录病毒(retrovirus,RV)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSVl-tk)基因转染,联合抗病毒药物核苷类似物羟甲基无环鸟苷(ganciclovir,GCV)对人卵巢上皮癌细胞系TYK细胞杀伤过程中所产生的旁观者效应.采用脂质体介导法将PLNTK5质粒转入包装细胞PA317后,以滴度高的PA317病毒上清液感染TYK细胞,遗传霉素G418筛选后,得到带有HWV1-tk基因的TYK细胞.将细胞按不同比例混合培养后,给予10μg/mlGCV,4d后用MTT法计算细胞存活率,观察旁观者效应.PLNTK5质粒成功转入PA317细胞,病毒滴度高者为6×105cfu/ml.用病毒上清液感染TYK细胞,成功地得到了表达HSV1-tk的卵巢癌细胞株TYK/tk.混合培养结果显示,TYK/tk细胞占混合细胞10%时,低浓度的GCV就可使一半以上的细胞杀死,证明了HSVl-tk/GCV治疗方法存在着旁观者效应.逆转录病毒可介导HSVl-tk基因转入TYK细胞并获稳定表达,HSV-tk/GCV系统存在旁观者效应.
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肿瘤基因治疗研究进展
目的:介绍目前基因治疗肿瘤的研究进展.方法:参考国内外相关文献,进行综合、分析、归纳.结果:反义核苷酸技术、抑癌基因的合理应用、药物敏感基因治疗、肿瘤免疫基因治疗、细胞因子及其受体基因治疗、抗原抗体基因治疗、改善肿瘤传统化疗疗效的基因治疗、RNA干扰技术和表达对蛋白酪氨酸激酶抑制的基因治疗等在实验室研究中取得一定进展.结论:随着医学科学技术的发展基因治疗将成为肿瘤治疗的常用医疗手段.
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自杀基因治疗肿瘤研究进展
基因治疗的策略主要有:(1)基因替换和基因补充,转换突变的癌基因或补充肿瘤细胞中缺失的抑癌基因;(2)基因导入以增强免疫效应细胞的抗癌效能;如:导入细胞因子基因和(或)免疫共刺激分子基因以增强免疫效应细胞的杀癌能力;(3)基因导入以增强肿瘤细胞的免疫原性,如:导入MHCI类抗原基因;(4)肿瘤药物敏感基因治疗--自杀基因的应用;(5)肿瘤药物耐受基因(MDR)治疗--造血功能的保护;(6)反意治疗技术:根据碱基互补原理,人工合成特定互补DNA或RNA片段(或其他化学修饰产物)抑制或封闭癌基因表达;(7)诱导分化治疗:在分化诱导剂的作有用下促进肿瘤细胞分化以达到治疗癌症的目的.目前,药物敏感基因--自杀基因治疗日益受国内外肿瘤研究者的关注,本文将这一疗法作一综述.
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卵巢癌药物敏感基因治疗研究进展
卵巢癌(OC)是妇产科死亡率高的恶性肿瘤,临床上多采用手术切除和联合化疗等传统方法治疗,效果有限.近年来,药物敏感基因治疗(DSGT)已逐渐成为卵巢癌基因治疗的一种重要方法,显示出较好的应用前景.现介绍药物敏感基因的作用机制并对目前肿瘤靶向治疗的现状和进展作一综述.
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单纯疱疹病毒胸苷激酶基因在肿瘤基因治疗中的应用
胸苷激酶基因在细菌和哺乳动物细胞中都存在,但只有病毒的胸苷激酶如单纯疱疹病毒胸苷激酶才能使更昔洛伟(ganciclovir,GCV)等核苷类似物磷酸化,磷酸化的核苷类似物干扰DNA的合成而中止细胞的复制,尤其在肿瘤细胞中.在近10年,人们利用HSV-tk基因通过病毒载体转染多种肿瘤细胞,然后给予更昔洛伟(GCV)或阿昔洛伟(acyclovir,ACV),在体外、体内试验对肿瘤细胞的杀伤作用都很明显.另外HSV-tk/GCV系统在抗肿瘤作用中有"旁观者"效应,即转染有HSV-tk基因的靶细胞与未转染的HSV-tk基因的靶细胞同样可被GCV杀伤.由于HSV-tk/GCV系统的抗肿瘤作用效果明显,安全性好,越来越多的肿瘤患者志愿接受实验,该系统已获准临床实验.本文综述了近10年来HSV-tk/GCV系统在抗肿瘤治疗探索中的应用,大量资料显示HSV-tk基因用于抗肿瘤治疗将是本世纪的重要方法.
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肿瘤药物敏感基因治疗研究进展
药物敏感基因疗法是将编码某一敏感性因子的基因转入细胞，其表达产物能将无细胞毒或低细胞毒作用的前体药物(Prodrug)转化为具有高细胞毒作用的药物，从而杀伤该细胞。该疗法不仅对转染目的基因的细胞有杀伤作用，而且对其周围局部未转……
