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复方四参颗粒提取和精制工艺优化
目的 对复方四参颗粒原药材的提取和精制工艺进行优化.方法 建立太子参中环肽B定量测定的HPLC方法.采用正交设计,以太子参环肽B的提取率为指标,对提取过程中的提取次数和时间,以及醇沉过程中的乙醇用量和体积分数进行考察.结果 方差分析发现,提取次数对太子参环肽B提取率的影响存在显著性差异(P＜0.05),其提取率随提取次数的增加而上升.佳提取和精制工艺为加12倍量水提取3次,每次1.5h,提取液浓缩后加1.5倍量70％乙醇进行醇沉.按佳工艺进行3次重复实验,结果太子参环肽B的提取率均在60％左右.结论 优化后的工艺稳定性良好,采用其对复方四参颗粒原药材进行提取和精制时,主要有效成分太子参环肽B的提取率较高.
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复方四参颗粒对动脉粥样硬化豚鼠动脉损伤的抑制作用及其对增殖细胞核抗原与连接蛋白的影响
目的:探讨复方四参颗粒对动脉粥样硬化模型鼠动脉斑块的抑制作用及其可能的作用机制.方法:将48只雄性豚鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、阳性药物(稳心颗粒)组及复方四参颗粒高、中、低剂量组.除空白组给予标准饮食外,其余各组按常规方法复制动脉粥样硬化模型,第8周起各药物组予相应药物.第12周实验终点处死动物后采集腹主动脉,并检测腹主动脉粥样硬化斑块的面积和动脉面积比值,Western blot测定腹主动脉增殖细胞核抗原(PCNA)和连接蛋白(Cx37,40,43和45)表达水平变化.结果:模型组的动脉斑块占动脉面积比显著高于空白组(P＜0.01),阳性药物组及四参颗粒中、高剂量组均较模型组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),而四参颗粒低剂量组无显著降低作用(P＞0.05).Western blot检测结果显示,模型组腹主动脉壁中PCNA的含量及Cx 37表达均较空白组显著升高(P＜0.01),Cx 43、Cx40和Cx 45表达均较空白组显著下降(P＜0.01);阳性药物组、四参颗粒高剂量组均可显著降低PCNA的含量与Cx 37表达(P＜0.01),显著升高Cx 43、Cx 40和Cx45的表达(P＜0.01),而四参颗粒中剂量组对PCNA及Cx 43、Cx 40和Cx 45的表达有显著改善(P＜0.05或P＜0.01),低剂量组仅对Cx 43、Cx 40和Cx45的表达有显著改善(P＜0.01).结论:复方四参颗粒对动脉粥样硬化引起的动脉损伤有显著的保护作用,其作用机制可能与下调PCNA蛋白及逆转连接蛋白在动脉壁的异常表达有关.
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复方四参颗粒对动脉粥样硬化豚鼠心肌损伤的保护作用
目的:探讨复方四参颗粒对动脉粥样硬化引发心肌损伤的保护作用及其可能的作用机制.方法:将60只雄性豚鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、阳性药物(稳心颗粒)组及复方四参颗粒高、中、低剂量组,每组各10只.空白组给予标准饮食;其余各组复制动脉粥样硬化病理模型,并于第8周造模成功后,模型组给予0.9％ NaC1溶液灌胃,稳心颗粒组及复方四参颗粒各组按设定剂量灌胃给药.连续用药4周后,动脉采血并采集心脏,检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK);测算心脏指数,并检测心肌细胞凋亡情况及相关凋亡因子的表达.结果:模型组LDH、CK和心质量指数、心室指数均较空白组显著提高(P＜0.01),而稳心颗粒组、复方四参颗粒高剂量组各指标均较模型组显著降低(P＜0.01),中剂量组的LDH和CK值也显著降低(P＜0.05).模型组的心肌细胞凋亡率和坏死率均明显高于空白组(P＜0.01),而稳心颗粒组、复方四参颗粒高剂量组均较模型组显著改善(P＜0.01),复方四参颗粒中、低剂量在细胞凋亡中晚期也有明显改善(P＜0.05);模型组Bcl-2蛋白表达较空白组明显下降、Bax与Fas蛋白表达均显著升高(P＜0.01),稳心颗粒组与复方四参颗粒高剂量组与模型组比较均可显著提高Bcl-2表达、降低Bax与Fas表达(P＜0.01),复方四参颗粒中剂量组可提高Bcl-2表达(P＜0.01),中、低剂量组均可显著降低Fas表达(P＜0.01).结论:复方四参颗粒对动脉粥样硬化引起的心肌损伤有显著的保护作用,其作用机制可能与双向调节凋亡相关因子,从而抑制心肌细胞凋亡有关.
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复方四参颗粒临床前急性毒性研究
目的:对复方四参颗粒的急性毒性进行临床前评价,为其新药申报工作奠定基础.方法:将ICR小鼠随机分为实验组和对照组(每组雌雄各半),实验组给予灌胃大浓度、大体积的复方四参颗粒,对照组灌胃等体积的蒸馏水,均1次/d,连续2d.每天观察小鼠的一般情况,并动态记录小鼠的体质量与摄食量;第15天处死所有小鼠,解剖,观察小鼠各脏器的变化,计算脏器系数.结果:实验过程中,实验组和对照组小鼠一般情况均未见异常,两组的体质量与摄食量比较均无显著性差异(P＞0.05);实验结束后,实验组和对照组小鼠的各脏器均未见异常,两组的主要脏器系数比较均无显著性差异(P＞0.05).结论:复方四参颗粒大剂量多次给药对小鼠无明显的急性毒性反应.
