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miRNA表达载体文献资料
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RNAi沉默Rab5a基因对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的的影响
目的 探讨miRNA表达载体靶向沉默Rab5a表达对人乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响.方法 设计4条miRNA干扰载体分别转染乳腺癌细胞MCF-7.应用RT-PCR和Western blot筛选出一组抑制效率高的miRNA干扰载体进行Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.结果 转染Rab5a-miRNA-2干扰载体对MCF-7细胞Rab5a表达抑制效果明显,RT-PCR结果显示其对Rab5a基因mRNA抑制率达到(50.01±2.69)%,Western Blot结果显示其对Rab5a蛋白抑制率达到(55.58±3.16)%.选择Rab5a-miRNA-2组干扰载体进行后续实验.Transwell实验显示,Rab5a-miRNA-2组穿膜细胞数为67.8±12.03,与阴性对照组和空白对照组之间均有显著性差异(P<0.01).结论 RNAi靶向沉默Rab5a基因可以抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭能力.
