首页 > 文献资料
-
雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞适浓度的筛选
目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的适作用浓度.方法 灌注法获取28 d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体.将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用.切下雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,调整细胞数为1×109/L后,将卵黄细胞接种于小盖玻片上,RPMI-1640含20%小牛血清培养,根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组(0、10、50、100、150、200 mg/L组).培养第7天,以核仁组织区相关嗜银蛋白(argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins,AgNORs)及乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase,LDH)为评价指标,对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色,Olympus-BH2显微镜观察,输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值.结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加,培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深,至100 mg/L时深,随后又逐渐变浅.图像分析显示,雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组(q10=14.2189、q50=18.3358、q100=35.6491、q150=13.1849、q200=13.8604,P＜0.01;q10=10.3377、q50=11.7532、q100=23.1883、q150=10.2792、q200=9.3052,P＜0.01).雄虫抽提物100 mg/L组与其他各组比较,AgNORs及LDH明显升高(q10=21.4302、q50=17.3132、q150=22.4642、q200=21.7887,P＜0.01;q10=12.8506、q50=11.4351、q150=12.8896、q200=13.8831,P＜0.01).结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性,其作用的适质量浓度为100 mg/L.
-
日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响
目的 观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响.方法 灌注法获取28 d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体.取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组.对照组以常规培养基培养,实验组以常规培养基含100 μg/ml雄虫抽提物培养.培养第7天,取实验组与对照组细胞制备标本并观察.结果 实验组成熟卵黄细胞出现概率较对照组高,核和胞质染色均匀;卵黄滴内的卵黄球之间界限清晰,数目可数;线粒体数目较少,电子密度较低.未成熟卵黄细胞胞质中粗面内质网较丰富.对照组中卵黄细胞的核和胞质电子密度降低,脂滴数目增多,空泡化程度严重,未见线粒体;成熟卵黄细胞中卵黄滴内的卵黄球之间已发生融合,有卵黄球从中释放出来,成为裸露体;未成熟卵黄细胞中卵黄球与外面包绕的膜之间空隙增大,粗面内质网扩大和囊泡变,核糖体脱颗粒.结论 日本血吸虫雄虫抽提物对雌虫卵黄细胞在体外的发育与存活具有促进作用.
