您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
转基因方法文献资料
-
动物生物反应器建立的主要方法与技术
本文在查阅大量国内外相关资料的基础上,结合具体的实验操作原理和规程,就建立动物生物反应器模型的方法与技术、转基因动物的应用和转基因动物存在的问题等进行了概括性的论述.其目的在于为进一步探讨转基因的科学原理、佳操作方法和技术,提高转基因的效率,建立理想的动物生物反应器等奠定基础.
-
小鼠子宫内电转基因方法的建立
目的:建立小鼠子宫内电转基因技术,比较分析转染绿色荧光蛋白(GFP)后对胚胎发育及相关蛋白表达的影响.方法:将怀孕15d的小鼠,水合氯醛麻醉后,取出两侧子宫,用毛细管注射针将2μg/μl的pCAGGS-GFP质粒0.5～1 μl准确注射到胎鼠侧脑室,在电压40 V、每次脉冲60 ms,间隔940 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后24 h取材,甲醛固定冷冻冠状切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化,荧光免疫组织化学检测α-SMA的表达差异.结果:妊娠15d孕鼠转染24 h后小鼠成活率80％(8/10),胚胎成活率为54.2％(13/24),存活胚胎GFP阳性表达率为61.5％(8/13),GFP阳性表达胚胎脑组织切片,基因转染区域和正常组织区组织形态结构和α-SMA表达不存在差别.结论:成功建立了小鼠子宫内电转基因的方法.
