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脱氧胆酸钠对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
目的:探讨脱氧胆酸钠(SD)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响.方法:(1)以不同终浓度(0、0.015mg/mL、0.05 mg/mL、0.15 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)的脱氧胆酸钠分别作用于人脐静脉血管内皮细胞,使用CCK-8检测细胞活力、TUNEL荧光染色检测细胞凋亡;(2)以终浓度为0.15 mg/mL的SD作用于HUVEC4、8、12h后用Western blot检测Caspase-3、7、9蛋白及PARP活化情况;(3)观察Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对0.15 mg/mL脱氧胆酸钠组的影响.结果:CCK8结果显示随SD浓度(0～ 1.0 mg/mL)及作用时间(0～12 h)增加,HUVEC活力降低,0.15 mg/mL时活力为80％,1.0 mg/mL时细胞活力仅不到10％;Tunel检测示随着SD浓度的增加HUVEC凋亡明显增多;Western Blot结果示SD作用于HUVEC后Caspase-3、7、9蛋白及PARP活化明显增加;Z-DEVD-FMK明显抑制了0.15 mg/mLSD引起的PARP活化.结论:脱氧胆酸钠(SD)通过启动Caspase级联反应介导了人脐静脉内皮细胞的凋亡.
关键词： 脱氧胆酸钠 人脐静脉内皮细胞 凋亡 Caspase蛋白酶 -
牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中caspase蛋白酶表达的初步研究
目的 研究在牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中caspase蛋白酶表达的变化.方法 对体外培养的人牙周膜细胞分别施加20％牵张应变6、24 h,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,采用免疫印迹技术检测caspase-3、-5、-7、-8、-9的蛋白表达,并采用分光光度比色法测定caspase-3、-5、-8、-9的蛋白酶活性变化.结果 20％牵张应变加载6、24 h可诱导人牙周膜细胞发生凋亡.caspase-3的蛋白表达及蛋白酶活性和caspase-7的蛋白表达在24 h牵张应变作用下较对照组增加,caspase-5、-8、-9的蛋白表达及蛋白酶活性在6、24 h牵张应变作用下较对照组增加.结论 20％牵张应变能诱导体外培养的人牙周膜细胞凋亡,此过程中伴随发生了caspase-3、-5、-7、-8、-9蛋白酶的活化.
关键词： 人牙周膜细胞 牵张 细胞凋亡 Caspase蛋白酶
