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重组质粒DNA D-GPEi工程菌发酵工艺的优化
目的 优化重组质粒D-GPEi工程菌发酵工艺条件.方法 控制相关发酵参数,观察溶解氧浓度、比生长速率和培养时间对工程菌生长和质粒浓度的影响.结果 发酵培养对数生长期溶解氧浓度控制在30%～50%.补料前比生长速率为0.5～0.7/h,6 h开始补料,比生长速率下降,12 h后比生长速率为0.1～0.2/h.连续发酵3批工程菌,21 h后收集菌体,得到菌体平均产量为89.4 g/L(A=52.6),质粒平均产量为359.8 mg/L.3批工程菌浓度和质粒拷贝数差异无显著意义.结论 此发酵工艺得到工程菌浓度和质粒拷贝数较高,重复性好,适用于大规模工业化生产.
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重组大肠杆菌高密度发酵生产L一色氨酸
为提高重组大肠杆菌生产L-色氨酸的产量,减少乙酸和色素的生成,考察了比生长速率的梯度控制和溶氧的分阶段控制对生产L-色氨酸的影响.在确定了合适的工艺控制后,L-色氨酸的产量提高为41.8g/L,比工艺优化前提高了30％.
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重组大肠杆菌高密度培养的进展
重组大肠杆菌高密度培养是增加重组蛋白产率的有效方法.选择佳的表达系统以及培养基和培养方式是获得高密度和高表达的重组大肠杆菌的有效途径.在培养过程中,通过控制副产物、pH、温度和诱导时机以及补料方式等参数则能有效地限定比生长速率,从而有利于获得高的密度和好的表达.文章从这几方面对近期的研究成果和未来的发展趋势进行了综述.
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菌体比生长速率及不同培养基成分变化对解脂假丝酵母中RNA累积的影响
为了研究解脂假丝酵母ATCC 20408菌株比生长速率和培养基中氨基酸成分对酵母RNA累积的影响.采用分批和连续培养的方法,解脂假丝酵母分别在发酵培养基、YPD培养基、糖蜜培养基以及不含玉米浆的成纤维细胞培养基(FM)中进行培养.结果表明,在分批培养的不同生长期,菌体细胞内RNA累积量有明显区别;在对数生长期时,RNA含量达干重的11.8%(g-RNA/g-DCW);稳定期时,RNA含量仅为6.9%.连续培养时,酵母RNA比生长速率越大,酵母RNA积累量越高,当细胞比生长速率为0.5 h<'-1>时,RNA含量可达15.6%,糖的转化率为42.8%.在不含玉米浆的FM培养基中加入不同的氨基酸组分进行有氧分批培养时,添加混合氨基酸或蛋白胨组分均可提高酵母细胞RNA的含量.本研究首次报道了高比生长速率和混合氨基酸组分对解脂假丝酵母细胞RNA的积累具有明显的促进作用,而比生长速率对酵母RNA的累积影响更大.
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活跃链霉菌合成那西肽的pH分段控制策略
目的 以pH分段控制策略提升活跃链霉菌产那西肽的发酵效价.方法 基于对活跃链霉菌合成那西肽基础代谢过程中的生物量、那西肽效价、糖、氨基氮以及pH值进行动态分析,以不同的单一pH值对发酵过程进行恒定控制,考察活跃链霉菌的生物量、比生长速率和那西肽合成的动态变化规律,来确定pH分段控制策略.结果 活跃链霉菌合成那西肽代谢过程中pH呈S形波动变化,菌体生长与那西肽合成的相对pH值有所不同.发酵过程恒定控制pH6.5模式下,活跃链霉菌具有大的比生长速率,恒定控制pH7.5模式下那西肽合成效价高.以C6H12O6/NH3·H2O补料方式进行pH分段控制,那西肽的合成能力比采用酸碱补料及生理酸碱性物质补料的控制模式强,发酵单位高.结论 以C6H 12O6/NH3·H2O模式进行补料,在0～72h时恒定控制pH6.5,此后恒定控制pH7.5,那西肽效价较未控制模式下提高了25.58％.
