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红藻氨酸致颞叶癫痫大鼠海马内Semaphorin3C、Semaphorin3F基因表达的研究
目的 研究神经轴索导向分子Semaphorin3C(Sema3C),Semaphorin3F(Sema3F)mRNA对颞叶癫痫(TLE)大鼠海马神经轴索环路重建的调控作用.方法 采用侧脑室内注射红藻氨酸(KA)制作TLE大鼠模型,用Nissl染色及原位杂交的方法,分别检测致痫后1d、1w、2w、3w、4w大鼠海马的齿状回(DG),CA_1区、CA_3区神经细胞丢失程度以及Sema3C、Sema3F mRNA的表达.结果 KA致病后1d始出现神经元丢失,至4w神经元丢失明显增多.KA致痫后1w,Sema3C、Sema3F mRNA在海马的CA_1区、Sema3F mBNA在海马的CA_3区表达明显下降,持续至3w(P<0.01),4w时恢复至正常(P>0.05);Sema3C、Sema3F mRNA在DG的表达,Sema3C在CA_3区的表达,实验组与对照组均无明显差别(P>0.05).结论 KA致痫后海马CA_1区神经元下调Sema3C、Sema3F mRNA的表达,CA_3区神经元下调Sema3F mRNA的表达,可能促进TLE大鼠海马神经轴索环路重建.
关键词： 红藻氨酸 颞叶癫痫 Semaphorin3C Semaphorin3F -
Semaphorin3F基因转染舌鳞状细胞癌细胞的方法研究
目的:探讨阳离子脂质体介导转染舌癌细胞的可行性,筛选含有Semaphorin3F(SEMA3F)的舌鳞状细胞癌细胞,检测SEMA3F基因在舌癌细胞中的表达.方法:应用阳离子脂质体转染方法将SEMA3F导入Tca8113细胞中,G418筛选阳性克隆,用RT-PCR检测转染组细胞中SEMA3F基因的表达.结果:Tca8113细胞中SEMA3F基因表达下调.筛选14d后,含有SEMA3F的转染组细胞克隆形成,SEMA3F在转染组细胞中表达稳定.结论:阳离子脂质体介导转染的外源性基因SEMA3F在Tca8113细胞获得稳定表达,为进一步实验奠定了基础.
关键词： 阳离子脂质体 舌鳞癌细胞 Semaphorin3F 基因转染 -
Semaphorin3F对大鼠海马神经元轴突生长锥作用的研究
目的 通过对原代海马神经元的培养及鉴定,Sema3F对原代海马神经元的作用,为进一步研究Sema3F及其受体功能提供实验方法及依据.方法 提取出生24小时内新生SD大鼠海马神经元的原代细胞,采用无血清培养技术培养海马神经元,鉴定海马神经元的纯度.分别给予不同浓度的sema3F干预,使用倒置显微镜,观察不同浓度的sema3F干预后,在不同时间海马神经元轴突的变化,了解Sema3F的生理学功能.结果 ①大鼠原代海马神经元培养体系的成功建立.②Sema3F能够使新生大鼠海马神经元的轴突生长锥发生塌陷.③相同时间内,随着Sema3F浓度的增加轴突生长锥的塌陷比率升高,表现为浓度依赖性(P<0.01).相同的Sema3F浓度,随着作用时间的延长轴突生长锥塌陷比率升高,表现为时间依赖性(P<0.01).结论 ①大鼠原代海马神经元体外培养体系成功建立;②Sema3F可在体外诱导大鼠原代海马神经元的轴突生长锥塌陷;③Sema3F体外诱导原代海马神经元轴突生长锥的塌陷具有时间依赖性和浓度依赖性.
关键词： 大鼠 原代海马神经元 体外培养 轴突生长锥 Semaphorin3F
