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皮肤点刺试验在变应性鼻炎中的临床意义
变应性鼻炎(allergic rhinitis ,AR)即过敏性鼻炎,是机体接触变应原后,主要由IgE介导的鼻黏膜非感染性炎性疾病[1].其患病率高且呈逐渐上升趋势,还可能诱发鼻窦炎、中耳炎、哮喘、结膜炎等,严重影响患者的生存质量.明确变应原对AR的预防和诊治有着重要意义.研究表明,由于地理环境和生活习俗等因素影响,不同国家和地区主要变应原种类有一定差异.为了解吉林市(地区)AR患者的变应原情况,对我院205例拟诊为AR患者进行常见变应原皮肤点刺试验( skin prick test,SPT),现报道如下:
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抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备并鉴定鼠源抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb).方法 重组Der fⅡ蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠免疫脾细胞与NS-1细胞融合.间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用筛选获得的单克隆细胞株诱生小鼠腹水,蛋白G亲和层析法纯化腹水抗体.利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型；通过间接ELISA、Western Blotting方法鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得5株IgG2a型鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,效价良好.ELISA和Western Blotting分析表明该5株单抗均可识别重组Der fⅡ蛋白和天然粉尘螨提取物.结论 成功制备了5株鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der fⅡ的检测及纯化方法奠定了基础.
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抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb).方法 利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合.通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价.ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物.其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别.结论 成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体.为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础.
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平榛主要过敏原C0rh1单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备和鉴定鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb).方法 用重组Cor h 1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合.通过间接ELISA法筛选分泌特异性McAb的杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白A亲和层析法纯化抗体.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该McAbs的特性和交叉性.结果 获得4株可稳定分泌鼠抗平榛主要变应原Cor h l的McAbs,其Ig亚型均为IgGl,均具有良好的效价;ELISA和Western Blotting分析表明该4株单抗均能识别重组Cor h l蛋白,其中3株单抗能够识别天然平榛提取物.结论 成功制备了4株鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体,为建立平榛主要变应原Cor h 1检测及纯化方法 奠定了基础.
