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粪便SFRP2基因甲基化与大肠癌的相关性研究
目的 探讨粪便中的分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因甲基化对大肠癌患者临床诊断的价值.方法选取2016年1月至2016年12月于我院就诊的大肠癌患者40例,同时选取健康志愿者40例.大肠癌患者作为观察组,健康志愿者作为对照组.采集两组患者粪便,采用PCR与凝胶电泳的方法进行SFRP2基因甲基化测定,比较两组患者SFRP2基因甲基化的情况,判定其是否可以作为大肠癌筛查的重要指标.结果大肠癌患者中出现甲基化的比率为80.00％(32/40),健康志愿者出现甲基化的比率为7.5％(3/40).与健康志愿者相比,大肠癌患者中出现SFRP2基因甲基化的比率大大升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论SFRP2基因的甲基化改变是筛选大肠癌的敏感标志,粪便SFRP2基因甲基化检测有望成为无创诊断大肠癌的新途径.
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联合检测血浆SFRP2、RNF180基因甲基化在胃癌临床诊断中的价值
背景:胃癌是一种常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均较高.启动子区异常甲基化导致基因沉默在肿瘤发生、发展中起重要作用.目的:探讨联合检测血浆SFRP2和RNF180基因启动子区甲基化在胃癌早期筛查和临床诊断中的应用价值.方法:收集2011年6月-2013年6月宁波市医疗中心李惠利医院67例胃癌患者和51名健康志愿者的血浆标本,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测血浆中SFRP2、RNF180甲基化水平,并分析其与临床病理特征的相关性.结果:胃癌患者血浆中SFRP2、RNF180基因启动子区甲基化发生率分别为67.2％和53.7％,明显高于健康志愿者的37.3％和23.5％,差异均有统计学意义(P＜0.01).胃癌患者SFRP2甲基化率与所有临床病理特征均无关(P＞0.05),RNF180甲基化率与肿瘤大小、临床分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移相关(P＜0.01).联合检测SFRP2、RNF180基因甲基化能提高胃癌临床诊断率,优于单一基因检测(OR =5.6,95％ CI:2.1 ～14.8,P＜0.01).结论:联合检测胃癌血浆中SFRP2、RNF180基因启动子区甲基化水平可提高胃癌检出率,是一种简单、非侵入的方法,可用于胃癌患者的临床早期筛查和诊断.
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降表达SFRP2基因对滋养细胞HTR-8侵袭和迁移能力的影响
目的:探讨SFRP2基因表达降低对人绒毛膜外滋养细胞HTR-8迁移和侵袭能力的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定降表达SFRP2基因的稳克隆细胞株,Transwell实验和划痕实验评估细胞的侵袭和迁移能力,Western blot法检测相关蛋白水平,平板克隆实验检测细胞的成球能力.结果:慢病毒转染SFRP2基因后,与HTR-8-vector组相比,HTR-8-shSFRP2-1/2组的穿膜细胞数增多、迁移距离增加;Vimentin、N-cadherin、MMP-9、MMP-2和Nanog、Oct4蛋白表达量明显增高,而E-cadherin蛋白表达量降低;细胞克隆形成数增加(P＜0.05).给予Wnt抑制剂XAV 939后,Wnt/β-catenin信号通路的活性受到抑制,HTR-8-shSFRP2-1/2组细胞的侵袭、迁移能力及干性减弱.结论:降表达SFRP2基因可促进人绒毛膜外滋养细胞HTR8的迁移、侵袭能力和干性.
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粪便基因甲基化分析对大肠癌的早期诊断价值
目的 探讨人粪便中分泌型卷曲相关蛋白(SFRP2)及增生性息肉蛋白(HPP1)基因甲基化分析对患者大肠癌诊断的价值.方法 从30例结直肠癌患者、30例结直肠腺瘤患者及30例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析其SFRP2及HPP1基因甲基化状态.结果 大肠癌、腺瘤和正常对照组的SFRP2基因甲基化阳性率分别为66.6％( 20/30)、50.0％ (15/30)和3.3％ (1/30).大肠癌、腺瘤和正常对照组的HPP1基因甲基化阳性率分别63.3％ (19/30)、43.3％ (13/30)和6.6％( 2/30).结论 SFRP2和HPP1基因甲基化是大肠癌进展过程中的早期事件.粪便SFRP2和HPP1基因甲基化分析可望成为大肠癌早期无创诊断的新途径.
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骨髓增生异常综合征患者分泌型卷曲相关蛋白2基因启动子区甲基化状态研究
目的 了解骨髓增生异常综合征( MDS)患者Wnt/β-catenin信号转导通路中拮抗基因分泌型卷曲相关蛋白2( SFRP2)的甲基化状态,研究其甲基化状态与染色体核型及生存的关系.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应( MSP)对43例MDS患者的骨髓或外周血SFRP2基因启动子区甲基化状况进行检测,并以70例门诊普通患者外周血检测结果为对照,同时对部分患者进行随访.结果 43例MDS患者中检出10例(23.3％)SFRP2甲基化,均为半甲基化状态,70例正常对照中未检出SFRP2的甲基化,组间差异有统计学意义(x2=17.86,P＜ 0.0001).10例SFRP2甲基化的样本中,5例来自骨髓,5例来自外周血,其中难治性贫血(RA)3例,伴环形铁粒幼细胞增多性难治性贫血(RAS)1例,难治性血细胞减少伴多系发育异常( RCMD)2例,原始细胞过多难治性贫血(RAEB)3例,MDS不能分类(MDS-U)1例.单因素分析结果显示不同性别、年龄、染色体核型、样本来源(骨髓/外周血)、危险度(WPSS≤2及＞2)间甲基化率差异无统计学意义,疾病进展与稳定组甲基化率差异亦无统计学意义(均P＞ 0.05).20例患者有染色体核型结果,16例进行了密切随访,3例转为急性髓系白血病( AML),死亡11例中2例为SFRP2甲基化阳性,但甲基化与非甲基化组间生存率差异无统计学意义(x2=0.022,P＞ 0.05).结论 MDS患者中SFRP2基因存在较高的甲基化修饰,这可能是MDS发病的分子机制之一；在MDS SFRP2的甲基化检测中,外周血有较好的代表性；该组患者例数较少,尚未发现甲基化与临床预后间的相关性.
