首页 > 文献资料
-
AP-1与NF-κB的活化表达与T细胞的无能
目的:探讨无能T细胞IL-2产生的缺乏与转录因子AP-1和NF-kappaB的关系.方法:通过提取活化组和无能组T细胞的核蛋白,进行凝胶电泳迁移率变动分析实验(EMSA),检测了转录因子AP-1和NF-kappaB的表达情况.结果:与活化组相比,无能T细胞中AP-1不但表达水平下降,且出现组份缺失现象;转录因子NF-kappaB在无能T细胞中的表达则高于活化组,但均有三种复合物存在.结论:无能T细胞IL-2产生减少或缺乏可能与转录因子AP-1和NF-kappaB表达紊乱(减弱或增强)以及组份的缺失有关.
-
CTLA-4与超抗原对SEA诱导T细胞无能的关联研究
在建立超抗原SEA诱导T细胞无能的体外模型基础上,观察了无能T细胞受SEA刺激时共刺激分子CD28和CTLA-4的表达.结果发现,与活化组相比,在SEA加入后的不同时相点无能T细胞上CD28的表达都是正常的,而CTLA-4分子在SEA加入的第60小时细胞表面有高水平的表达.这些结果表明,超抗原SEA诱导的这种无能状态与CTLA-4所介导的抑制作用增强有关.
关键词： 共刺激分子 CD28/CTLA-4 无能 超抗原SEA -
超抗原葡萄球菌肠毒素A对体内T细胞无能的诱导规律
目的:通过不同的间隔天数,连续多次给予小鼠腹腔注射超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA),观察注射后T细胞的表型变化,并找寻SEA在小鼠体内对T细胞无能的诱导规律. 方法:将80只小鼠随机分为4组:间隔3d组、间隔28d组、阳性对照组和阴性对照组,每组20只小鼠.每组于末次注射后的不同天数,用流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞上CD3、CD4、CD8、CD69、CD25的表达,并将细胞体外继续培养72h,用单四唑(MTT)法测定细胞的增殖能力. 结果:间隔3d组和间隔28d组中,连续3次注射SEA后,小鼠脾淋巴细胞中CD3的表达均显著下降(P＜0.01),2组中CD8的表达水平基本相似;但间隔3d组中,CD4的表达在末次注射后3d内明显降低(P＜0.05);末次注射后3d内,CD25的表达明显高于末次注射后第7d(P＜0.05).间隔28d组中CD4的表达较稳定,无显著升降;CD25的表达水平较低.SEA连续3次注射后,间隔3d组的细胞从第21d开始出现较弱的增殖反应,至第28d增殖反应明显提高.间隔28d组的细胞在第28d始出现较弱的应答反应. 结论:小鼠体内反复注射超抗原SEA可诱导T细胞无能,注射间隔时间的长短可能与无能的触发无关,但影响了CD4亚群的克隆清除,即间隔时间越短,被清除的CD4 T细胞越多;间隔时间越长,CD4 T细胞清除的程度越小.尽管CD25与T细胞无能的诱导密切相关,但CD25可能不参与无能状态的维持.T细胞的免疫无反应性并不是绝对的和持久的,在一定条件下,它可再次对超抗原的刺激出现反应.
-
腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰对骨髓基质细胞功能的影响
目的通过腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),探讨基因修饰对BMSCs主要功能的影响.方法以CTLA4Ig-重组腺病毒转染BMSCs,通过测定粘附于BMSCs层的3H-TdR标记CD34+细胞的 cpm值,观察基因修饰对其粘附力影响;通过观察骨髓基质细胞支持CD34+扩增的细胞总数及集落形成细胞数(colony forming cell,CFC)的变化,评价基因修饰对BMSCs支持CD34+细胞扩增能力的影响.结果转染组与对照组BMSCs对CD34+细胞的粘附力及支持CD34+细胞扩增的能力均无显著差异(P>0.05).结论适当条件下,腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰BMSCs不影响其对CD34+细胞的粘附力及支持CD34+细胞扩增的能力.
-
特异性免疫治疗对哮喘小鼠的作用及机制的初步研究
目的探讨特异性免疫治疗对哮喘小鼠的作用及其可能机制.方法通过卵蛋白(OVA)皮下注射的方法对致敏小鼠进行特异性免疫治疗,观察肺组织病理、支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及分类、ELISA检测血清OVA特异性IgE(sIgE)及脾脏T淋巴细胞IL-2和IL-4的分泌,3H-TdR掺人法检测T淋巴细胞的增殖反应,并与OVA致敏及激发的哮喘小鼠相比较.结果哮喘特异性免疫治疗明显抑制小鼠肺组织炎症病理改变;BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数显著减少(P＜0.05);血清sIgE显著降低(P＜0.05);T淋巴细胞IL-2和IL-4的分泌显著降低(P＜0.05);T淋巴细胞对OVA的特异性刺激的反应显著降低(P＜0.05).结论特异性免疫治疗可显著抑制哮喘小鼠的炎症反应;诱导T淋巴细胞无能可能是特异性免疫治疗减轻哮喘相关炎症反应的机制之一.
-
CTLA-4在超抗原诱导T细胞无能中的作用研究
目的探讨CTLA-4对T细胞无能的诱导作用.方法通过使用超抗原SEA作为一种无能诱导剂,建立体外无能模型,检测了无能T细胞在受到SEA的再次刺激时其膜分子CD28和CTLA-4的表达.结果与活化T细胞相比,无能T细胞在免疫应答的后期阶段表面表达高水平的CTLA-4分子,而CD28的表达则只较活化组T细胞稍高一些.结论CTLA-4表面表达水平的升高很可能与T细胞无能状态的诱导有关.
-
超抗原诱导T淋巴细胞增殖和无能的体外研究
目的:研究超抗原SEA在诱导T细胞增殖和无能产生中的规律和作用.方法:SEA在体外对小鼠脾淋巴细胞进行单次和多次诱导,测定其增殖能力,CD4、CD8、CD69变化和胞内、外IL-2的表达.并测定无能T细胞对加大SEA剂量和外源性IL-2的应答反应.结果:1×SEA组,SEA显著促进T细胞活化和增殖,胞内胞外IL-2均快速增加.2×SEA组,SEA能诱导T细胞继续增殖,但增殖指数的绝对值和胞内胞外的IL-2明显下降.3×SEA组,细胞无增殖,胞内胞外几乎测不到IL-2.并且加大SEA剂量不能改变细胞的无能状态,外源性IL-2只能部分逆转T细胞无能.结论:SEA对初始CD4+T细胞和CD8+T细胞均能诱导活化和增殖,但受浓度限制;SEA三次刺激T细胞诱导无能细胞形成;T细胞无反应性不受SEA剂量限制,T细胞受抗原刺激不能产生IL-2不是无能状态产生的唯一原因.
