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银屑病患者骨髓CD34+细胞RUNX1及其靶基因SLC9A3R1的研究
目的:研究转录调节因子RUNX1及其靶基因SLC9A3R1在银屑病患者骨髓CD34+细胞中的表达及SLC9A3R1与NAT9之间RUNX1的连接位点,以揭示银屑病患者造血干细胞的活性,为深入阐明银屑病患者免疫异常的根源及造血细胞在其中的作用提供理论依据.方法:采用免疫磁珠法分离CD34+细胞,RT-PCR法分别检测RUNX1和SLC9A3R1的mRNA表达,直接测序法检测PCR产物中SLC9A3R1与NAT9之间RUNX1连接位点DNA序列.结果:银屑病患者骨髓CD34+细胞RUNX1表达阳性率低于正常对照组(P＜0.05);银屑病患者骨髓CD34+细胞SLC9A3R1表达水平明显高于正常对照组(P＜0.05),且与PASI评分正相关(r=0.48,P＜0.05);在SLC9A3R1与NAT9之间未发现RUNX1连接位点的突变.结论:决定银屑病患者骨髓CD34+细胞分化的关键基因RUNX1存在异常;银屑病患者骨髓RUNX1和SLC9A3R1可能通过对骨髓造血微环镜和造血干细胞的异常调节参与银屑病的发病.
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过表达SLC9A3R1对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的影响
目的 探讨SLC9A3R1在MDA-MB-231乳腺癌细胞中过表达后,对其恶性表型是否具有逆转作用.方法 将pBK-CMV-HA和pBK-CMV-HA-SLC9A3Rlwt质粒转染不表达SLC9A3R1的人MDA-MB-231乳腺癌细胞,经G418筛选,建立稳定高表达SLC9A3R1的MDA-MB-231细胞系.经Western blot法验证后,采用CCK-8试剂盒检测肿瘤细胞增殖活性,采用软琼脂集落形成方法检测SLC9A3R1对MDA-MB-231细胞形成集落能力的影响,并采用流式细胞仪检测SLC9A3R1对MDA-MB-231细胞凋亡的影响.结果 SLC9A3R1可使MDA-MB-231细胞的增殖能力明显减弱,达50％以上(第5天P=0.0016,第6天P=0.002,第7天P=0.006).相比MDA-MB-231细胞和整合了空载体的细胞,SLC9A3R1过表达可使MDA-MB-231细胞系锚定无关的增殖能力明显减弱[(2.9±0.47)％、(2.52±0.08)％和(1.33±0.33)％],达47％(P=0.007).相比整合了空载体的MDA-MB-231细胞,SLC9A3R1过表达可使MDA-MB-231细胞系凋亡百分比明显增多[(2.23±1.41)％和(9.23±2.97)％],达4倍以上(P=0.018).结论 SLC9A3R1可抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖和迁移能力.
