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高表达衔接蛋白Src羧基端激酶结合蛋白对Jurkat细胞形态及功能的影响
背景:衔接蛋白分子的联动和协同有效调控 T 细胞的信号转导,形成级联放大或限制,终实现 T 细胞复杂的免疫功能。蛋白分子 Src 羧基端激酶结合蛋白正是衔接蛋白的一种,其主要是通过负反馈调节Src家族激酶活性。而这种负反馈调节作用依赖于Src羧基端激酶结合蛋白的Y317,可能涉及Src羧基端激酶的SH2结构域。目的:探索衔接蛋白Cbp对Jurkat细胞形态及功能的作用。方法:构建仅表达增强绿色荧光蛋白的融合蛋白和 Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的融合蛋白的病毒颗粒。将Jurkat细胞分为未转染组、阴性对照组和Src羧基端激酶结合蛋白组,后2组转染仅表达增强绿色荧光蛋白的病毒和转染Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的病毒。结果与结论:细胞转染效率大于95%,Src羧基端激酶结合蛋白定位于细胞膜上。转染Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白病毒的 Jurkat 细胞,皱缩细胞增多,大小均一性较差,细胞坏死凋亡的数量增加,细胞中 Src 羧基端激酶结合蛋白基因表达上调,Src羧基端激酶表达下降,而酪氨酸蛋白激酶表达增加。提示 Jurkat 细胞转染Src羧基端激酶结合蛋白后,可使细胞存活率下降,细胞信号转导功能减弱。