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间充质干细胞构建组织工程化气管的研究与应用
背景:间充质干细胞诸多特有的良好生物学特性使得其在组织工程化气管研究中成为理想的种子细胞来源.目的:总结间充质干细胞在构建组织工程化气管领域的研究现状、进展、存在的问题及展望.方法:由作者检索PubMed数据库及CNKI数据库1979至2012年,在英文标题和摘要中以“mesenchymal stem cells,tissue-engineered trachea”和“tracheal chondrocytes,tracheal epithelial cells,tracheal vascular endothelial cells”检索,中文文献检索中以“间充质干细胞、组织工程化气管、气管软骨细胞、气管上皮细胞和气管血管内皮细胞”为关键词,选择与组织工程化气管相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志的文章,共纳入51篇.结果与结论:组织工程化气管种子细胞研究主要包括软骨细胞、上皮细胞和血管内皮细胞.实验已证实,间充质干细胞可定向分化为软骨细胞,细胞因子在诱导间充质干细胞分化为软骨过程中起着关键作用.目前尚未发现合适的诱导因子能特异性诱导间充质干细胞定向分化气管上皮细胞.有研究发现间充质干细胞具有向上皮细胞分化的潜能.间充质干细胞在体内或体外特殊条件下可诱导分化为血管内皮细胞,为间充质干细胞作为种子细胞分化血管内皮细胞应用于组织工程化气管起到借鉴作用.
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新生兔气管软骨细胞的生物学特性
目的：探讨体外分离培养的新生兔气管软骨细胞的生物学特性。方法：通过酶消化法体外分离培养新生兔气管软骨细胞；倒置显微镜观察软骨细胞形态及生长状况；电镜观察软骨细胞超微结构；运用real-time PCR、免疫细胞化学染色和甲苯胺蓝染色检测气管软骨细胞分泌的细胞外基质成分。结果：体外分离、培养的兔气管软骨细胞呈短小三角形或不规则形贴壁生长。超微结构显示细胞较多突起，孔隙较多，胞质丰富，细胞器发达，细胞内可见大量蛋白分泌物。软骨细胞表达I、II型胶原、蛋白聚糖等，以II型胶原和蛋白聚糖表达为主。免疫细胞化学染色II型胶原和SOX9阳性，I型胶原弱阳性。甲苯胺蓝染色阳性。结论：适宜的酶消化单层培养法获得的新生兔气管软骨细胞具有分泌软骨细胞外基质成分的特性，可初步为体外构建组织工程气管治疗新生兔气管狭窄的实验研究提供种子细胞。
