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mPEG-CS纳米粒文献资料
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mPEG-CS纳米粒介导livin shRNA基因纳米复合物的制备及转染效率
背景:作为非病毒基因转染载体,可降解的高聚物形成的纳米载体目前被广泛由于基因转染,为他们具有良好的缓释性,向性和生物相容性.目的:制备mPEG-CS纳米粒,讨mPEG-CS作为Livin shRNA基因转染载体的可行性.方法:通过离子交联法制备mPEG-CS纳米粒,用聚乙二醇对壳聚糖进行改性,过静电吸附法制备载livin shRNA的基因纳米复合物.Zeta-size分析仪和透射电镜检测空白纳米粒和载livin shRNA的基因纳米复合物的形态、粒径和zeta电位,定基因纳米复合物的包封率,胶电泳阻滞实验和DNase I酶消化实验验证纳米粒对基因的保护作用.利用佳条件下制备的基因纳米复合物,染大肠癌HT-29细胞,察转染效率.结果及结论:成功制备出约60 nm的mPEG-CS纳米粒,纳米粒与基因体积比为3∶1时,到的基因纳米复合物形较规则,径100 nm左右;其包封率为(94.32±0.35)%.凝胶电泳阻滞实验表明纳米粒能够紧密结合DNA,基因具有良好的基因保护作用.该基因纳米复合物转染大肠癌细胞的转染效率高,续作用时间长.mPEG-CS纳米粒作为基因转染载体,基因具有保护作用,够将livin shRNA重组质粒高效转染入大肠癌细胞,够在大肠癌细胞内长时间表达,服了RNA干扰在基因治疗肿瘤中基因作用时间较短的缺点.
