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hLMO4文献资料
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hLMO4基因重组质粒的构建及蛋白表达和定位
目的 构建hLMO4真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 提取人乳腺癌MCF-7细胞的mRNA.反转录为cDNA.PCR扩增hLMO4全长编码基因,亚克隆至pCDNA3.1-myc-his A表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞BGC823中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用共聚焦激光扫描显微镜观察pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位.结果 hLMO4全长基因序列克隆到了真核表达载体pCDNA3.1-myc-his A中.酶切鉴定片段为500bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为23KD.pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位以细胞核为主,在细胞浆内少量表达.结论 成功的构建了hLMO4全长基因真核表达载体,pEGFP-LMO4蛋白定位于乳腺癌细胞质和核内.
关键词： hLMO4 乳腺癌 Westem blot
