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ERCC2/XPD基因缺失对短波紫外线所致CHO细胞DNA损伤修复的影响
目的 探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2 (excision repair cross complementation group 2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在短波紫外线(UCC)所致细胞DNA损伤与修复过程中的作用.方法 采用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)野生型AA8及ERCC2蛋白表达缺失型UV5构建细胞对照模型.MTT法比较两种细胞经UVC处理后细胞抑制率的差别;彗星试验与Rad51免疫荧光试验检测经不同照射强度的UVC处理后修复1、3、6和24 h,不同细胞对UVC所致DNA损伤修复能力的差异.结果 与野生型AA8相比,UV5对UVC所致DNA损伤更加敏感,细胞存活率降低(P＜0.05).彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞DNA损伤程度较AA8严重,并且修复UVC所致DNA损伤的能力降低(P＜0.05).结论 ERCC2/XPD基因缺失细胞DNA损伤修复能力下降,说明ERCC2/XPD修复酶在UVC所致DNA损伤的切除修复过程中发挥重要作用.
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ERCC2/XPD基因缺失对苯并[a]芘所致DNA损伤修复的影响
目的:探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2 (excision repair cross complementation group 2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在苯并[a]芘所诱导的细胞DNA损伤与修复过程中的作用.方法:应用中国仓鼠卵巢细胞系CHO野生型AA8和ERCC2表达缺失型UV5作为细胞对照模型,MTT法比较两种细胞经苯并[a]芘处理后细胞抑制率的差别；彗星试验和Rad51免疫荧光试验检测不同浓度苯并[a]芘处理及修复24 h后细胞DNA损伤修复的情况.结果:与野生型AA8细胞相比,UV5细胞对苯并[a]芘所致损伤更加敏感,细胞存活率降低(P＜0.05).彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞由于缺失ERCC2/XPD基因,修复苯并[a]芘所致DNA损伤能力降低(P＜0.05).结论:ERCC2/XPD蛋白在核苷酸切除修复中发挥解旋作用,对苯并[a]芘所致DNA损伤修复至关重要.
关键词： 核苷酸切除修复交叉互补基因2 苯并[a]芘 核苷酸切除修复 AA8 UV5
