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Sao蛋白文献资料
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Sao蛋白多克隆抗体制备鉴定及促全血杀菌作用
目的 制备2型猪链球菌(S.suis2)表面抗原一(Sao)重组蛋白的多克隆抗体,鉴定其免疫学特性.方法 通过PCR从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组中扩增基因Sao,构建重组表达质粒pET28a-Sao,转化E.coli BL21,异丙基硫代半乳糖苷诱导表达目的蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达产物,His亲和层析柱纯化重组蛋白,利用纯化后Sao蛋白制备多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,评价Sao多克隆抗体的促全血杀菌作用.结果 构建的重组质粒可以在宿主菌中高效表达,纯化后获得的重组蛋白纯度可达90％;间接酶联免疫吸附试验测定Sao多克隆抗体效价为1∶102400; Western blot结果显示,Sao多克隆抗体有较好的特异性;全血杀菌实验显示,05ZYH33在含有Sao多抗血清的全血中相对存活率下降85％.结论 本研究制备的2型猪链球菌重组Sao蛋白多克隆抗体效价高,特异性好,可明显增强全血对细菌的杀伤作用.
