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铅暴露对大鼠脑海马mGluR5表达和学习记忆影响
目的 观察发育期慢性低浓度铅暴露对大鼠脑海马代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)表达和学习记忆能力影响.方法 30只孕鼠按体重随机分成3组,分别给予双蒸水、0.05％、0.20％醋酸铅饮水,断乳后仔鼠自行饮用含铅水,至出生后28、56 d用水迷宫方法测试仔鼠学习记忆行为改变;蛋白印迹(Western blot)方法检测脑海马mGluR5蛋白表达.结果 发育期慢性低浓度铅暴露可导致仔鼠空间定位航行能力降低;与对照组比较,训练第3、5、7d,0.05％、0.20％醋酸铅组大鼠寻找平台时间[分别为(40.13±9.20)、(32.82±6.45)、(26.83±7.12)和(61.50±13.84)、(54.51 ±9.65)、(19.81±4.92)s]明显延长,差异有统计学意义(P＜0.05);生后第7、14、21、28 d,0.05％,0.20％醋酸铅组脑海马mGluR5蛋白表达量分别为[(0.607±0.027)、(0.845±0.010)、(0.713±0.004)、(0.587 ±0.011)]和[(0.540±0.025)、(0.573±0.014)、(0.551±0.014)、(0.492±0.017)],均明显低于对照组(P＜0.05).结论 孕鼠低水平铅暴露可致仔鼠空间学习能力降低,其机制可能与脑海马mGluR5蛋白表达水平下降有关.
关键词： 海马 代谢型谷氨酸受体5(mGluR5) 学习记忆 -
沉默mGluR5对卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及其机制研究
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)靶向代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及可能的机制.方法 采用靶向mGluR5表达的特异siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞(转染组),同时设置转染无义序列的阴性对照组.转染48 h,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测siRNA对mGluR5的沉默效果;采用CCK-8法、EdU细胞荧光染色实验、Hoechst 33342细胞染色实验、划痕实验检测沉默mGluR5表达后SKOV3细胞的活性、增殖、凋亡和迁移情况;采用Western blotting检测PTEN/Akt信号通路相关蛋白的表达情况.结果 QPCR检测显示,转染组中mGluR5 mRNA的表达水平降至(18.3±2.3)％,显著低于阴性对照组(P＜0.05).CCK-8法检测显示,转染72 h阴性对照组的吸光值为4.1±0.2,高于转染组的2.4±0.3(P＜0.05).EdU免疫荧光染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞增殖率为(22.4±2.3)％,高于转染组的(9.2±1.2)％(P＜0.05).Hoechst 33342细胞染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞凋亡率为(6.2±1.3)％,低于转染组的(28.2±2.2)％(P＜0.05).划痕实验显示,阴性对照组的相对划痕愈合比例为(100.0±2.1)％,显著高于转染组的(48.6±4.3)％(P＜0.05).Western blotting检测显示,转染组PTEN蛋白的表达增加,p-Akt蛋白的表达降低(P＜0.05);而Akt蛋白无明显变化(P＞0.05).结论 沉默mGluR5表达能显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞迁移能力,该过程可能与激活PTEN/Akt信号通路有关.
