首页 > 文献资料
-
628例HBV-M与HBV-DNA和ALT结果分析研究
目的 研究分析HBV-M(乙肝血清学标志物)与HBV-DNA(乙肝病毒脱氧核糖核酸)和ALT(丙氨酸氨基转移酶)的相互关系及临床意义.方法 对628例慢性乙肝患者血清,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测HBV-DNA,用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HNV-M全自动生化分析仪速率法检测ALT.结果 乙肝患者血清中HBV-DNA阳性总检出率为48.09%,ALT总升高率为25.64%.其中HbeAg+组中HBV-DNA和ALT检出率高;其次:HbsAg(+)、HbeAg(+),HbcAb(+)(大三阳)组中血清HBV-DNA检出率71.29%(154/216),ALT↑43.98%(95/216);HbsAg(+)、HbeAb(+)、HbcAb(+)(小三阳)组血清HBV-DNA检出率为32.69%(102/312),ALT↑13.46%(42/312);HbsAg(+)、HbcAb(+)、组血清HBV-DNA检出率为23.07%(12/52),ALT↑7.69%(4/52);HbsAg(+)、HbsAb(+)、HbeAg(+)、HbcAb(+)组血清HBV-DNA检出率为75%(3/4),ALT↑50%(2/4);HbsAg(+)、HbsAb(+)、HbeAb(+)、HbcAb(+)组血清HBV-DNA检出率为25%(1/4),ALT↑25%(1/4);HbsAg(+)、HbeAg(+)组血清HBV-DNA检出率为85.71%(24/28),ALT↑53.57%(15/28);HbsAg(+)组血清HBV-DNA检出率为50%(6/12),ALT↑16.67%(2/12).结论 联合检测乙肝患者血清中HBV-M和HBV-DNA及ALT,对乙肝HBV感染、复制及传染性的判断,临床诊治和预后判断均具有重要意义.
-
PPN抑制HBV-DNA表达及复制的体外实验
目的体外观察PPN对HBV-DNA表达、复制的抑制效果及其细胞毒性作用.方法取10μg/ml、20gg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/mlPPN水溶液分别加入2.2.15细胞株培养悬液中,8天后用放射免疫法检测上清液中HBeAg的含量,并计算HBeAg抑制率、细胞存活率、HBeAg抑制率为50%时的药物浓度(ID50)、实验组存活细胞为对照组的50%时的药物浓度(CD50)和治疗指数(TI).PCR技术检测HBV-DNA阳性血清中加入160μg/ml PPN水溶液后对HBV-DNA复制的抑制作用.结果当加入的PPN浓度为160μg/ml和80μg/ml时,HBeAg抑制率分别为89.8%和82.4%,细胞存活率分别为98.7%和99.2%;HBV-DNA阳性血清中加入PPN后可有效抑制其复制.结论PPN可有效抑制HBV-DNA的表达和复制,且对靶细胞(肝细胞)无细胞毒作用,有进一步研究和推广应用的价值.
-
应用MGB探针检测人乙型肝炎病毒的基因型
目的 检测血浆或血清样本中人乙型肝炎病毒HBV的基因型,建立了基于MGB探针的实时荧光定量PCR检测体系. 方法 在HBV基因组型特异性碱基的聚集区域设计荧光定量PCR引物及探针,为保证特征特异性及高分辨率,选择设计MGB探针,然后将PCR扩增的产物纯化后进行基因克隆,克隆成功后提取的质粒制备为阳性质控品,从而建立完整的MGB探针法的荧光定量PCR检测体系,后对该检测体系进行方法学评价. 结果 成功建立了基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测体系.方法学评价显示,该检测体系的灵敏度达50 IU/mL;重复性好;特异性良好,以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性. 结论 本研究建立基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测方法,可以很好地定性的检测血浆或血清样本及血液制品中的人乙型肝炎病毒HBV的基因型及含量,对于该疾病的临床治疗具有重要的意义.
-
应用MGB探针检测人乙型肝炎病毒的基因型
目的 检测血浆或血清样本中人乙型肝炎病毒HBV的基因型,建立了基于MGB探针的实时荧光定量PCR检测体系. 方法 在HBV基因组型特异性碱基的聚集区域设计荧光定量PCR引物及探针,为保证特征特异性及高分辨率,选择设计MGB探针,然后将PCR扩增的产物纯化后进行基因克隆,克隆成功后提取的质粒制备为阳性质控品,从而建立完整的MGB探针法的荧光定量PCR检测体系,后对该检测体系进行方法学评价. 结果 成功建立了基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测体系.方法学评价显示,该检测体系的灵敏度达50 IU/mL;重复性好;特异性良好,以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性. 结论 本研究建立基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测方法,可以很好地定性的检测血浆或血清样本及血液制品中的人乙型肝炎病毒HBV的基因型及含量,对于该疾病的临床治疗具有重要的意义.
