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PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌耐药性

杨柳;苏明权;程晓东;郝晓柯;岳乔红;于文彬

摘要: 目的: 探讨耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药性的关系以及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chain reaction-single strand cinformation polymorphism, PCR-SSCP)方法的临床应用价值. 方法: 用PCR-SSCP方法检测58株结核分枝杆菌临床分离株katG, rpoB, rpsL基因突变并与常规药敏试验检测结果进行对比. 结果: 经常规药敏试验检测,58株结核分枝杆菌临床分离株中共有41株耐药,其中,耐异烟肼(INH)为35株,高耐药株27株;耐利福平(RFP)为31株,高耐药株24株;耐链霉素(SM)有31株,高耐药株26株. 同时耐3种药物的有21株(51.2%),耐2种药物的14株(34.1%),单耐药株6株(14.6%). PCR-SSCP方法对58株临床分离株katG, rpoB, rpsL基因突变的检测率为40%(23/58), 45%(26/58), 38%(22/58),其中检出3个基因同时突变的有13株(32%),2种基因突变的12株(29%),1种基因突变的有10株(23.8%). 常规药敏试验与PCR-SSCP法检出结核分枝杆菌同时耐3种药物的符合率为61.9%(13/21),检出耐2种药物的符合率为85.7%(12/14),检出耐1种药物的符合率为50%(3/6). 高耐药株中突变率为80.5%(62/77),低耐药株中突变率为60%(12/20). 结论: PCR-SSCP方法对耐2种以上药物的结核杆菌检出率较高,且耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高. 将PCR-SSCP法与药敏试验联合应用可互相弥补,已成为临床指导用药的好方法.

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