修饰hTERT核心启动子靶向转录FCY1的重组腺病毒的构建及鉴定
摘要： 目的: 构建并鉴定雌激素反应元件与缺氧反应元件共修饰人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子靶向转录酵母胞嘧啶脱氨酶(FCY1)的复制缺陷型重组腺病毒.方法: 构建由雌激素反应元件(ERE)和缺氧反应元件(HRE)串联重复序列共修饰的hTERT核心启动子,将该启动子序列与酵母胞嘧啶脱氨酶(FCY1)基因插入穿梭质粒,用穿梭质粒与辅助质粒共转染HEK 293细胞,获得重组腺病毒载体Ad-EHhT-FCY1,经 PCR鉴定证实后,采用终点稀释试验测定病毒滴度. 结果: 经24HRE与8ERE共修饰的hTERT核心启动子序列经正反向测序均正确;穿梭质粒和辅助质粒共转染的HEK 293细胞,在转染后7～10 d出现了典型的细胞病变反应(CPE), PCR反应能扩增出122bp的目的片段,终点稀释试验测定得到的病毒滴度为6.2×107 pfu*mL-1. 结论: 成功构建并获得高滴度的ERE与HRE串联重复序列共修饰的hTERT核心启动子引导FCY1转录的复制缺陷型重组腺病毒.
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先天性右冠状动脉缺如1例
1临床资料患者女,68岁.因活动后胸闷7 a,加重2 mo拟诊"冠心病"入院.患者7 a来反复活动时出现胸闷,近2mo症状进行性加重,步行或爬楼梯至2楼时出现,持续时间约20 min,自服"救心丹"后可缓解.既往无黑朦、晕厥,无胸痛、咯血.有高血压病史10 a余,不规则服用降压药,血压波动于140～160/60～70 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa).糖尿病病史4 a,服用二甲双胍治疗.
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MTX介入治疗异位妊娠导致严重口腔溃疡1例护理
1 临床资料患者,女,26岁.异位妊娠MTX介入治疗后,口腔溃疡伴肛周皮肤溃烂9 d加重3 d入院.14 d前该患者在B超监测下行异位妊娠MTX介入治疗术,MTX总量50mg.5 d后口腔轻微溃疡,3 d前加重,进食水后疼痛剧烈,张口困难,并伴肛周皮肤溃烂7～8 cm,无发热、腹痛、腹泻、黑便等不适[1].
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剖宫产后再次妊娠分娩方式母婴结局248例分析
1临床资料我院2000-01/2007-12共收住剖宫产后再次妊娠孕妇248例,年龄25～39(30.3±2.8)岁,孕周32～42(38.5±2.5)wk,术后间隔时间1～9 a.占本院同期分娩总数1.2%,占同期剖宫产总数5.1%.终止妊娠方式的选择①选择阴道试产条件:未出现新的剖官产指征,无再次子宫损伤史如穿孔、肌瘤剔除术等.
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胱硫醚β-合酶活性测定及应用
0 引言目前国外测定胱硫醚β-合酶(CBS;EC4·2·1·22)活性的方法有放射性同位素标记法和分光光度法,而国内还少有报道.我们在动物实验表明消脂方具有防治动脉粥样硬化作用[1]的基础上,为了解消脂方是否通过影响CBS以抗动脉粥样硬化,建立CBS活性分光光度测定方法,并用此法检测消脂方对实验性鹌鹑CBS活性的影响.
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亚急性海绵状脑病1例
1临床资料患者,女,59岁.因头痛、头晕50 d,视力下降、言语不利、行走困难1 mo余入院.患者自述患"高血压病"6 a;"左侧面肌痉挛"6 a;"神经官能症"10 a.入院前50 d无诱因出现额前部疼痛,局部麻木,伴头晕、心慌;无视物模糊、双影及视物旋转;无耳鸣,听力无下降,恶心、呕吐,胸闷、气短等.测血压185/100 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),即卧床休息,扩血管处理后血压平稳,余不适症状无缓解.
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瑞芬太尼控制性降压应用于脑肿瘤手术30例
1临床资料选择我院脑肿瘤ASA Ⅰ～Ⅱ级行开颅摘除术患者30例,年龄15～52岁,体质量47～76 kg,无高血压、贫血、凝血机制障碍.随机将患者分为瑞芬太尼组(R组)15例,硝普钠组(N组)15例.采用气管内插管静吸复合全麻,切开脑膜后开始控制性降压,目标为平均动脉压(MAP)60～65mmHg(1 mmHg=0.133 kPa).R组以瑞芬太尼2μg/kg缓慢静脉注射后给予0.08～0.5μg/(kg·min)维持;N组以硝普钠3～8 μg/(kg·min)持续静脉注射,60 min后停止降压并记录2组术中MAP、心率(HR)、中心静脉压(CVP)的变化情况,计算动脉-颈内静脉球部血氧含量(Da-jvO2)、脑氧代谢率(CERO2).应用SPSS10.0统计分析软件进行统计学处理,数据以-x±s表示.P＜0.05为差异有统计学意义.结果:2组患者一般情况、手术时间、补液总量、输血量、尿量、CVP差异均无显著性.
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自体角膜上皮干细胞移植联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉的临床观察
0 引言翼状胬肉是眼科的常见病,临床上以手术治疗为主.但术后极易复发[1],反复多次手术可导敛角膜缘屏障功能破坏和睑球粘连.为减少其术后复发率,我们切除原发性和复发性翼状胬肉病变后,进行自体角膜缘含上皮干细胞粘膜移植联合丝裂霉素C治疗,获得了理想的临床效果,现报告如下:
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胸腔镜辅助小切口食管癌根治术的临床应用
0 引言胸腔镜手术因微创、出血少、术后疼痛轻、并发症少、住院时间短等优点,而愈来愈得到广泛认可.我们为食管癌患者施行了胸腔镜小切口辅助下食管癌根治术,术后进行随访观察,取得良好的手术效果,现报道如下.
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口腔颌面部创伤298例临床分析
1 临床资料选择我院颌面部创伤患者298例(男226,女72),年龄4～79(平均32.8)岁.其中交通肇事所致合并伤162例(54.3%),摔伤51例(17.1%),斗殴伤62例(20.9%),其它运动损伤23例(7.7%).下颌骨骨折99例,上颌骨骨折56例,颧弓骨折45例,上颌骨加颧弓骨折37例,下颌骨加颧弓骨折23例,上下颌骨联合骨折21例,上下颌骨加颧弓骨折14例,其它3例.
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准分子激光上皮下角膜磨镶术治疗高度近视2177例护理
1临床资料 2002-01/2008-12我院收治高度近视患者2177(男726,女1451)例(4256眼),年龄18～38岁.术前患者屈光度-6.00～13.00(平均-8.00)DS,散光-0.5～-3.5 DC,中央角膜厚461～533(平均495)μm.患者眼部进行常规检查,排除圆锥角膜、青光眼及眼底病变.手术采用鹰视酷眼准分子激光机(德国)和准分子激光上皮下角膜磨镶(LASEK,法国)手术专用器械进行.
