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反义寡核苷酸在肝癌细胞中的分布及作用

王宏光;李开宗;窦科峰;陈丹;王春梅

摘要: 目的研究人肝癌细胞系SMMC7721细胞对血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)的摄取及其分布、作用特点,为ASODN的进一步应用提供相关的理论依据. 方法采用人工合成荧光标记的VEGF ASODN作用于SMMC7721细胞,通过激光共聚焦显微镜观察ASODN在肝癌细胞中的分布情况,定量分析ASODN作用的浓度及时间特点,确定ASODN作用的佳浓度及时间. 结果 ASODN在肝癌细胞中的浓度随作用时间的延长而逐渐升高,12 h内即可达到作用浓度,48 h达到高峰,以后则逐渐降低,可持续72 h以上. ASODN在细胞内的分布密度随作用浓度的升高而升高,但当达到一定的作用浓度后,细胞内ASODN的含量随作用浓度增加升高的并不明显,其中5 μmol*L-1是ASODN较为理想的作用浓度. 在非分裂期肝癌细胞内,ASODN的分布部位主要位于胞质,胞核也有少量分布,而在分裂期肝癌细胞则主要分布在胞核,且其对ASODN的摄入能力远大于非分裂期细胞. 结论对VEGF ASODN的深入研究可使其有望成为抗肝癌的新一代基因治疗药物.

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