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植物抗肿瘤药物研究-七彩中国医学论文

时间:2012-04-28 10:35来源:未知 作者:360期刊网2 点击:

七彩中国医学论文       医学论文发表      中华医学论文        医学护理论文
  从植物中寻找抗肿瘤药物及抗肿瘤辅助药物,在国内外均为抗肿瘤药物研究的重要组成部分。国际上普遍认为最理想的抗癌药物是那些通过刺激机体自身免疫系统而发挥正常防癌功能的药物。目前应用于临床的抗肿瘤化疗药物多数对机体免疫能力起抑制和破坏作用,在杀灭机体内癌细胞的同时也损伤机体正常组织,副作用大[8]。大量临床和实验资料显示,皂苷具有免疫调节作用。
  开口箭系百合科Liliaceae铃兰族开口箭属植物,为着名的传统中药。医学古籍记载,开口箭味甘微苦,性寒,主治劳热咳嗽、跌打损伤、风湿痹痛、月经不调、崩漏带下等症;其中中医认为月经不调、崩漏带下即是现代宫颈癌的常见症状。初步实验表明开口箭具有祛痰、抗炎、抑菌及醒酒作用[1,2]。
  本实验室通过实验显示湖北省产开口箭含有甾体皂苷和甾体皂苷元,且含量较高[3]。有关研究结果表明,皂苷具有增强免疫功能、抗辐射、抑制肿瘤生长、抗炎、降血糖等广泛的生物学活性,近年越来越受人们的普遍关注。有研究证实开口箭同属植物皂苷成分有细胞毒活性[4,5]。本文旨在通过体外抗肿瘤实验,观察开口箭皂苷对宫颈癌细胞Hela细胞和肝癌细胞HepG2细胞的细胞毒活性,并通过流式细胞仪评价开口箭活性部位对Hela细胞细胞周期的影响和诱导该肿瘤细胞凋亡情况。现报道如下。
  MTT法是目前抗癌药物体外筛选较好的方法,方法简便、快速,所需细胞数较少,便于大规模进行药物敏感实验。本实验采用MTT法评价开口箭活性部位的细胞毒作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法与其它初筛方法如台盼蓝计数法相比具有主观性低,简便易行等优点,因此被广泛用于抗肿瘤药物的初筛。在优化的实验条件下,采用环磷酰胺做阳性对照,通过对人肝癌细胞HepG2和宫颈癌细胞Hela细胞的MTT实验,结果显示开口箭总皂苷、30%皂苷和70%皂苷能够使显着抑制体外培养的Hela和HepG2细胞株,与阴性对照组比两者各浓度组均有非常显着性差异(P<0.005),且在此浓度范围内细胞毒作用呈现较明显的剂量依赖性;进一步通过比较两者的半数有效浓度,得出开口箭皂苷对肝癌细胞HepG2较为敏感,即开口箭皂苷抗肿瘤具有一定的选择性。
  采用流式细胞术评价开口箭活性部位对Hela细胞细胞周期的影响和凋亡情况,最初采用的是70%乙醇固定过夜,但实验发现该方法容易使细胞成团,而且测出的凋亡峰比较高,由此改进为本实验中的实验方法,细胞成团的情况得到改善,但是凋亡峰明显降低。结果表明,开口箭总皂苷、30%皂苷、70%皂苷和环磷酰胺能够诱导体外培养的Hela细胞凋亡,且高剂量的开口箭总皂苷、70%皂苷能够引起细胞坏死;开口箭总皂苷、30%皂苷、70%皂苷和环磷酰胺都能使Hela细胞细胞周期阻滞于S期,提示开口箭总皂苷、30%皂苷、70%皂苷能诱导人宫颈癌细胞分化。本实验发现开口箭皂苷对Hela和HepG2细胞有较强的细胞毒作用,而且开口箭皂苷能够诱导Hela细胞凋亡,且能够将Hela细胞细胞周期阻滞于S期从而诱导Hela细胞分化。
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