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近年来，在围绝经期综合征等妇科病的治疗中，雌激素替代疗法因副作用明显［4］，人们将更多的关注投向了植物雌激素以及含有植物雌激素成分的中草药及其复方。以此为切入点，采用目前较常用的筛选雌激素方法--人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖实验，从影响ER阳性MCF-7细胞增殖的角度进行了研究，结果显示：石榴皮、罗勒、鹰嘴豆、枸杞水提物均能使ER阳性MCF-7细胞增殖，提示它们具有拟植物雌激素样活性，因中药植物雌激素与雌二醇结构的相似性，可能与雌激素受体相结合而发挥一定的雌激素效应。该作用与这些中药所含的木脂素、香豆素、黄酮类成分有关。
长期以来，许多中草药植物被广泛应用于妇科病的治疗和保健［1］，中药所含植物雌激素成分在其中发挥的药效作用不容忽视。因与雌激素化学结构相似［2］，植物雌激素是植物中可以与哺乳类动物及人类的雌激素受体相结合并将其激活的一类化合物，被证实存在于包括中草药在内的多种植物中，而且在体内具有双向调节作用，即一方面在体内雌激素水平较低时，可与ER结合发挥雌激素样作用；另一方面，在体内雌激素水平较高时，植物雌激素可通过竞争性结合靶细胞ER而产生抗雌激素样作用，即减弱靶细胞对雌激素的应答。因此，近年来植物雌激素又被称为“选择性雌激素受体调节剂”或中药选择性雌激素受体调节剂。对中药植物雌激素活性筛选、活性成分及其作用机制、特别是关于这些成分对雌激素依赖性肿瘤细胞增殖的影响的研究尚不够深入。
本研究在上报的茯苓等中药雌激素活性筛选的基础上，选择课题组正在研究的富含黄酮类、香豆素类、木脂素类及二苯乙烯类成分的新疆石榴皮、红景天、罗勒、阿里红、枸杞、肉苁蓉、锁阳、鹰嘴豆、新疆鼠尾草等9种天然药物，对其植物雌激素活性进行了初步的筛选。
酵母双杂交技术是Fields等于1989年提出，是在重组基因酵母法基础上发展起来的一种新的环境雌激素物质的检测方法［5］，是基于核激素受体和辅激活蛋白之间的配体依赖作用而建立起来的实验系统。在酵母双杂交系统中，雌激素受体（ERs）与酵母转录子GAL4的DNA结合域（DNA-BD）结合，辅激活蛋白与DNA转录激活域（DNA-AD）结合，构建质粒。由于ER与辅激活蛋白相互作用BD与AD在空间上接近，从而激活GAL4的激活序列（UAS）下游启动子调节的lac-Z报告基因表达，产生β-半乳糖苷酶。
因此β-半乳糖苷酶的活性大小就和ERs与辅激活蛋白之间的相互作用强度大小一致。但只有在雌激素物质存在的情况下，ERs才能和辅激活蛋白结合，引起BD和AD在空间上接近，从而激活lac-Z报告基因表达，产生β-半乳糖苷酶。根据这一原理，通过测定β-半乳糖苷酶的活性即可反映受试物的雌激素样作用。有机体是一个复杂的体系，体外实验结果仍需整体动物实验加以验证。因此，应当注意在选择进行体外实验的同时，为了避免实验结果的假阳性和假阴性，再进一步进行传统的体内实验，以保证获得更加准确的结论。
本研究用经典的E-screen和Yeast Two-Hybrid Assay实验，筛选了9种受试物的雌激素活性。以人乳腺癌MCF-7细胞增殖实验结果评价，石榴皮、鹰嘴豆、罗勒、枸杞均具有雌激素样活性；以酵母双杂交实验结果评价，石榴皮、鹰嘴豆有雌激素样活性。鼠尾草、肉苁蓉、锁阳、阿里红、红景天在两种体外实验筛选中均无显示出雌激素样活性，至于它们是否具有雌激素样作用还需从其它途径进行研究。
近些年来，酵母双杂交法应用范围得到了较大扩展，不仅应用于检测那些用于发展新牙科聚合物的化学物质的雌激素活性［6］，也同时应用于检测和评价羟基化多氯联苯的雌激素和甲状腺激素活性［7］，以及评价多种化合物的抗雌激素活性［8］和天然药物的雌激素活性的筛选研究［9］。本实验结果显示：鹰嘴豆、石榴皮水提液均能使酵母系统中β-半乳糖苷酶活性增加，表现出具雌激素样作用。
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