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单克隆抗体M4G3文献资料
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人乳腺癌细胞cDNA文库的构建及鉴定
目的:应用前期制备的一株乳腺癌单克隆抗体(M4G3),筛选出高表达其相关抗原的乳腺癌细胞系T47D,并利用此细胞系构建了以λgt11为载体的cDNA文库,为完成此乳腺癌特异抗原基因的克隆与表达奠定基础.方法:在4株乳腺癌细胞中应用M4G3单抗进行免疫组化和Western BlOT检测,以其中一株T47D细胞为材料构建以λgt11为载体的cDNA文库,并进行文库质量鉴定.结果:文库含有9.97×105个重组子,重组效率达到96.7%,插入的cDNA片段平均长度为1.0kb.结论:与M4G3单抗结合的乳腺癌抗原分子量约为48 000 dalton.构建的T47D细胞cDNA文库完整,具有较好的质量,为进一步筛选奠定了基础.
